Gentechnik Insulin Produktioun

Insulin - e Bauchspaicheldrüs Hormon dat reguléiert | Kohlenhydratmetabolismus an Erhalen vun engem normalen Niveau vun der Cazdpaam Blutt. De Mangel vun dësem Hormon am Kierper féiert.) Zu enger vun de seriösten Krankheeten - Diabetis, déi als Doudesursauer op der drëtter Plaz steet no kardiovaskuläre Krankheeten a Kriibs. Insulin ass eng kleng Globus | Protein enthält 51 Aminosaierreschter a besteet aus zwee Polypeptid Ketten, déi vun zwou Disulfidbrécke verbonne sinn. Et gëtt synthetiséiert a Form vun engem Eenheetsketten fetale Virgänger, preproinsulin, enthalen koi eng zentral Signalpeptid (23 Aminosauerreschter) an e 35-Link Verbindungspeptid (C-peptid). Wann d'Signalpeptid entfernt gëtt, gëtt proinsulin aus 86 Aminosauerreschter an der Zell geformt, an där A a B Ketten Insulin verbonne sinnC-neien Tweed, deen hinnen déi néideg Orientéierung op $ 3 op der Disulfidbindung liwwert. Nom proteolytesche Detachement vum C-Peptid gëtt Insulin geformt.

Verschidde Forme vun Diabetis sinn bekannt. Déi schwéierst Form, fir d'Behandlung vun deem de Patient Insulin brauch (eng Insulin-ofhängeg Form vun der Krankheet), gëtt duerch de selektiven Doud vun Zellen, déi dëst Hormon synthetiséieren, verursaacht (Zellen vun den Insele vu Langerhans an der Bauchspaicheldrüs). Eng Form vun Diabetis mellitus, fir déi eng Behandlung mam Insulin net erfuerderlech ass, ass méi heefeg, et ka mat der Hëllef vu passenden Diäten geréiert ginn a re:> ma. Normalerweis gëtt d'Bauchspaicheldrüs vu Rëndfleesch a Kéi net an der Fleesch- a Konservenindustrie benotzt a gëtt an de Killapparater fir pharmazeutesch Firmen geluecht wou d'Hormonekstraktioun duerchgefouert gëtt. Fir 100 g cr! Thallic Insulin erfuerdert 800-1000 kg Füterstock

D'Synthese vu béide Ketten an d'Verbindung vun hire disudfidesche Bindungen fir Insulin ze kréien goufen 1963 an 1965 duerchgefouert. dräi Fuerschungsteams an den USA, China an Däitschland. 1980 huet déi dänesch Firma Novo Industri eng Method entwéckelt fir Schwäininsulin a mënschlecht Insulin ze konvertéieren andeems den 30. Iwwerreschter vun Alanin an der Kette B duerch en Threoninreste ersat gëtt. Béid Insulin huet net an der Aktivitéit an der Dauer vun der Handlung ënnerscheet.

D'Aarbecht un der Gentechnik vum Insulin huet viru ronn 20 Joer ugefaang. 1978 koum e Message iwwer d'Produktioun vun engem Stamm vun der Escherichia coli produzéiert Rat proinsulin (USA). Am selwechte Joer goufen individuell mënschlech Insulinketten duerch Ausdrock vun hire syntheteschen Genen an Zellen synthetiséiert.E.C.coli(Fig. 5.11). Jiddereng vun den erzielten syntheteschen Genen gouf op den 3'-Enn vum Enzymgen (3-Galactosidase ofgestëmmt) an an de Vektorplasmid agefouert(pBR322).ZellenE.C.colitransforméiert mat sou rekombinante Plasmiden, goufen hybrid (chimeresch) Proteine ​​produzéiert, déi aus engem Fragment vun p-Galactosidase bestinn an A oder B Insulinpeptid, dat iwwer e Methioninreste verbonne war. Wann Dir e chimärescht Protein mat Cyanogenbromid veraarbecht, gëtt de Peptid entlooss. Wéi och ëmmer war d'Schließung vun Disulfidbrécke tëscht de geformten Insulinketten schwéier.

Am Joer 1981 gouf e Pro-Insulin Analog, Mini-C-Pro-Insulin, synthetiséiert, an deem d'35-Eenheet C-Peptid duerch e Segment vu sechs Aminosaieren ersat gouf: arg-arg-gly-ser-lys-arg a säin Ausdrock gouf gewisenE.C.coli.

1980 isoléiert de W. Gilbert a seng Kollegen Insulin mRNA vun engem Ratten-Bauchspaicheldrüs P-Zell-Tumor a kritt cDNA dovun mat Reverse Transkriptase. Déi resultéierend cDNA gouf an de Plasmid agebautpBR322E.colian der Mëtt Deel vum Penicillinase Gen. De rekombinante Plasmid enthält Informatiounen iwwer d'Struktur vum Proinsulin.Als Resultat vun der mRNA Iwwersetzung gouf en Hybridprotein an den Zellen synthetiséiert déi Penicillinase a Proinsulin Sequenzen, déi mat Trypsin aus sou engem Protein verdaut goufen.

1978 hunn d'Mataarbechter vum Institut Bioorganic Chemistry ënner der Opsiicht vun Acad. Yu A. A. Ovchinnikov, zwee strukturell Genen déi d'Synthese vun Neuropeptiden kodéieren goufen synthetiséiert:leucine- enkephalin a bradykinin.De synthetiséierten leucine enkephalin Gen hat zwee "plakeg" Enden:

De resultéierende synthetesche Gen gouf zesumme mat engem natierlechen DNA Fragment mat dem Promoteur an dem proximalen Deel vum E. coli P-galactosidase Protein Gen agebautE.colizum Plasmid

Insulin kréien, Methoden fir genetesch Ingenieuren, Biotechnologie - Coursen

1. D'Struktur a Funktioune vum Insulin 5

1.1. D'Struktur vun der Insulin Molekül 5

1.2. Déi biologesch Bedeitung vun Insulin 7

1.3. Insulin Biosynthese 8

2. Gentechnik Insulinsynthese 10

2.1. D'Benotzung vu gentechneschen Methoden fir d'Synthese vun Drogen 10

2.2. Genetesch Ingenieursmethoden 11

2.3. Gentechnik Insulin Produktioun 14

Auszich aus Text

Ausserdeem kënne béid vun dëse Komponenten gläichzäiteg an der Zesummesetzung vum Hybridprotein präsent sinn. Ausserdeem, wann Dir Hybridproteine ​​kreéiert, kann de Prinzip vun der Multidimensionalitéit benotzt ginn - d'Präsenz vu verschiddenen Exemplare vum Zilpolypeptid am Hybridprotein, wat d'Ausbezuele vum Zilprodukt wesentlech kann erhéijen.

A Groussbritannien goufe béid Strenge vum mënschlechen Insulin mat E. coli synthetiséiert, verbonne mat enger Molekül vum biologesch aktive Hormon. Fir datt en Eenzellular Organismus Insulinmoleküle op seng Ribosome synthetiséiert, ass et noutwendeg et mam noutwendege Programm ze liwweren, dat heescht, den Hormongen derzou anzeféieren.

Rekombinant Insulin gouf um Institut vun der Russescher Akademie vun de Wëssenschaften mat genetesch manipuléierten Stämme vun E. coli kritt. E Hybrid Virgängerprotein gëtt aus der gewuessener Biomass ausgedréckt, a Quantitéiten ausgedréckt

40. vum Gesamtzellularprotein enthält preproinsulin.

Seng Konversioun an Insulin in vitro gëtt an derselwechter Sequenz wéi in vivo duerchgefouert - de féierende Polypeptid gëtt geklappt, preproinsulin gëtt an Insulin duerch d'Stadien vun der oxidéierter Sulfitolyse ëmgewandelt, gefollegt duerch eng reduktiv Zoumaache vun dräi Disulfidbindungen an enzymatescher Isolatioun vum bindende C-Peptid. No enger Serie vun Ionaustausch, Gel an HPLC chromatografesche Purificatioune kritt e Mënsch Insulin mat héijer Rengheet an natierlecher Aktivitéit.

Fir Insulin ze kréien, gëtt e Stamm benotzt mat enger Nukleotid-Sequenz an de Plasmid ausgedréckt, deen en Hybridprotein ausdréckt, deen aus engem linearem Proinsulin besteet an e Fragment vum Staphylococcus aureus Protein A verbonnen un säin N-Uschloss duerch e Methioninreschter 8, 9, 10.

D'Kultivatioun vun der gesättigte Biomass vun Zellen vum rekombinantem Stamm bitt den Ufank vun der Produktioun vun engem Hybridprotein, d'Isolatioun an d'Seksequent Transformatioun vun deem a Réier féiert zum Insulin.

En anere Wee ass och méiglech: am Bakteriesystem Ausdrock vun engem rekombinantem Protein ze kréien deen aus mënschleche Proinsulin a Polyhistidin Schwanz mat him verbonne gëtt duerch e Methioninreschter. Et ass isoléiert mat Chelatchromatographie op Sailen mat Ni-agarose a Brom Spaltung.

Dat isoléiert Protein ass S-sulfonéiert. Kartéieren a Massespektrometresch Analyse vum gewonnenen Proinsulin purifizéiert duerch Ionaustauschschromatographie op Anionaustauschharz a RP (ëmgedréit Phas) Héichleistung Flëssegkeetchromatographie weisen d'Präsenz vun Disulfidbrécke, déi entspriechen dem Disulfidbrécke vum nativen Mënsch Proinsulin.

Viru kuerzem gouf opmierksam gemaach fir d'Prozedur ze vereinfachen fir rekombinant Insulin duerch genetesch Ingenieuren ze produzéieren.Also, zum Beispill, kënnt Dir e Protein kréien, dee besteet aus Proinsulin verbonne mat dem N-Uschloss duerch de Lysinreschter vum Interleukin Leader Peptid

2. De Protein gëtt effektiv ausgedréckt a lokaliséiert an Inklusiounskierper. No der Isolatioun gëtt de Protein fir Insulin a C-Peptid ze produzéieren mat Trypsin 5, 8, 10 gekollt.

De resultéierend Insulin a C-Peptid gi vu RP-HPLC gereinegt. Ganz bedeitend beim Schafe vu geschmoltene Strukturen ass de Verhältnis vun de Massen vum Trägerprotein an dem Zil Polypeptid.

C-Peptide mat der Hëllef vun Aminosauer-Raumofstander, déi de Sfi I Restriktiounssäit droen an zwee Argininreschter am Ufank an um Enn vum Spacer fir eng spéider Protein Trypsin Verdauung sinn nom Head-tail Prinzip verbonne ginn.

D'HPLC vun de Spaltungsprodukter weist datt d'Spaltung vum C-Peptid quantitativ virugeet, an dëst erlaabt d'Benotzung vu multimeren syntheteschen Genen fir Zilpolypeptiden op industriellem Plang ze produzéieren.

Konklusioun

Radikal, an an deene meeschte Fäll, deen eenzege Wee fir d'Liewen an d'Aarbechtskapazitéit vu Patienten mat Diabetis mellitus ze halen ass bis elo, Insulin.

Ier Dir Insulin an der klinescher Praxis kritt an agefouert gouf, war e fatalen Ausgang fir een oder zwee Joer erwaart vum Ufank vun der Krankheet vum Typ I Diabetis Patienten, trotz der Benotzung vun de meeschte debilitéierende Diäten.

Typ I Diabetis Patienten brauche lifelong Ersatztherapie mat Insulinpräparatiounen. De Verlaf vun der regulärer Administratioun vun Insulin aus engem oder engem Grond féiert zu der rapider Entwécklung vu Komplikatiounen an dem rapide Doud vum Patient.

De Moment ass d'Prévalenz vun Diabetis op drëtter Plaz no Krankheeten am Herz-Kreislauf-System a bösart Tumoren. D'Prévalenz vun Diabetis ënner Erwuessener, laut der Weltgesondheetsorganisatioun, an de meeschte Regioune vun der Welt ass 2-5% an tendéiert all erop

1. Joer vun der Zuel vu Patienten bal verduebelt. D'Zuel vun Insulin-ofhängeg Patienten, trotz dem offensichtleche Fortschrëtt am Beräich vun der Gesondheetsariichtung, geet all Joer erop, an de Moment a Russland eleng ass ongeféier 2 Millioune Leit.

Déi verspriechend Methode fir Insulin ze produzéieren si genetesch Ingenieursmethoden. Genetesch manipuléiert Insulin gëtt kritt duerch getrennt produzéiere Ketten A a B mat verschiddene Produzenterstämme a spéider Faltung vun der Molekül, gefollegt vun der Trennung vun Isoformen, an d'Synthese vu Proinsulin an E. Coli Zellen mat senger Spaltung mat Trypsin an Carboxypeptidase an der Produktioun vum nativen Insulin.

D'Kreatioun vun Medikamenter vun hausgemaach genetesch manipuléierten mënschlechen Insulin mécht nei Méiglechkeeten op fir vill Probleemer vun der russescher Diabetologie ze léisen fir d'Liewe vu Millioune Leit mat Diabetis ze retten.

Literatur

Balabolkin M.I., Klebanova E.M., Kreminskaya V.M. Diabetis mellitus: modern Aspekter vun der Diagnostik a Behandlung / Dokter, Ed. G.L.

Gavrikov, A.V. Optimiséierung vun der biotechnologescher Produktioun vu Substanzen vu rekombinante mënschlechen Interferonen: dis. ... cand. biol. Wëssenschaften - M, 2003

Genetesch manipuléiert mënschlecht Insulin. D'Effizienz vun der chromatografescher Trennung erhéijen andeems de Prinzip vun der bifunktionalitéit benotzt. / Romanchikov A.B., Yakimov S.A., Klyushnichenko V.E., Arutunyan A.M., Wulfson A.N. // Bioorganesch Chimie, 1997 - 23, Nr. 2

Glick B., Parsnip J. Kontroll vun der Notzung vu biotechnologesche Methoden // B. Glick, J. Parsnip / Molecular Biotechnology = Molecular Biotechnology. - M.: Mir, 2002 .-- S. 517-532. - 589 p.

Glick B., Pasternak J. Molekulär Biotechnologie. Prinzipien an Uwendung. M .: Mir, 2002.

Davis R., Botstein D, Roth J. Methoden vun der Gentechnik. Genetik vu Bakterien // R. Davis, D. Botstein, J. Roth / Per. aus Englesch.-M .: Mir. - 1984.- 176 p.

Den Ermishin A.P.Genetesch modifizéiert Organismen: Mythen a Wierklechkeet / A.P. Ermishin // Mn .: Tekhnalogaliya.- 2004. - 118 p.

Fundamenter vun der Pharmazeutescher Biotechnologie: Léierbuch / TP Prischep, V.S. Chuchalin, K.L. Zaykov, L.K. Mikhaleva. - Rostov-op-Don .: Phoenix, Tomsk: NTL Verlag, 2006.

Patrushev L.I. Kënschtlech genetesch Systemer. // L. I. Patrushev / M .: Nauka.- 2004.

Romanchikov, A.B. Genetesch manipuléiert mënschlecht Insulin. D'Effizienz vun der chromatografescher Trennung erhéijen andeems de Prinzip vun der bifunktionalitéit benotzt. / A.B. Romanchikov an anerer.

// Bioorganesch Chimie. 1997. Nr 2. S. 23

Rybchin V.N. Fundamentals of Genetic Engineering // V.N. Rybchin / 2. Ed., Revised. an dobäizemaachen: Textbuch fir Universitéiten. SPb .: Verlag vun SPbSTU. - 2002 .-- 522 s.

Schelkunov S. N. Gentechnik // Schelkunov S. N. / Novosibirsk: Sib. univ. Verlag. 2008.

Schelkunov, S.N. Genetik: Textbuch. Erlaabnes. - 2., ed., Rev. a füügt. - Novosibirsk: Sib. univ. Verlag, 2004 .-- 496 S.

1. D'Location vun Disulfidbindungen am Insulinmolekül.

2. D'Arrangement vun Aminosauerreschter am Insulinmolekül

Den Effekt vum Insulin op wichteg metabolesch Enzymen

Liewer Muskel Adipose Tissu Aktivéierung 1. Phosphodiesterase 1. Phosphodiesterase 1. LP-Lipase

4. Pyruvat Dehydrogenase Komplex

4. Pyruvat Dehydrogenase Komplex

5. Phosphatase Glycogen Synthase an Glykogen Phosphorylase

5. Glycogen Synthase Phosphatase b. Acetyl-CoA-Carboxylase Induktioun 1. Glucokinase 1. Glyceraldehyd Phosphat Dehydrogenase

6. Glukose-6-Phosphat-Dehydrogenase Repressioun Phosphoenolpyruvat Carboxykinase

Figebam. 3 Schema vun Insulinbiosynthese an β-Zellen vun den Insele vu Langerhans. ER - endoplasmatesch Retikulum. 1 - Bildung vun engem Signalpeptid, 2 - Synthese vu preproinsulin, 3 - Spaltung vum Signalpeptid, 4 - Transport vum Proinsulin an de Golgi Apparat, 5 - Ëmwandlung vum Proinsulin an Insulin a C-Peptid an Inklusioun vun Insulin a C-Peptid an sekretoresch Granules, 6 - Insulinsekretioun a C Peptid.

4. Allgemeng Schema fir d'Synthese vun Insulin vu senge Virgänger

Figebam. 5 Synthese vun Insulin duerch d'Bildung vun zwee getrennten Ketten

D'Methode fir genetesch manipuléiert mënschlecht Insulin ze kréien

D'Erfindung bezitt sech op d'Feld vun der Biotechnologie, a besonnesch op d'Produktioun vun genetesch manipuléierten mënschlechen Insulin fir d'Produktioun vun Medikamenter, déi an der Behandlung vun Diabetis mellitus benotzt ginn.

D'Methode gëtt duerch d'Kultivatioun vun engem Produzentstamm vun engem Hybridprotein, dee mënschleche Proinsulin enthält, Escherichia coli BL21 / pPINS07 (BL07) oder Escherichia coli JM109 / pPINS07, d'Zellen duerch Desintegratioun gestéiert, Inklusiounskierper mat Hybridprotein getrennt.

Als nächst gëtt virleefeg Wäschung vun Inklusiounskierper, gläichzäiteg Opléisung vum Protein a Restauratioun vun Disulfidbindungen an engem Puffer mat 5-10 mM Dithiothreitol an 1 mM EDTA duerchgefouert, Renaturéierung a Puréierung vum renaturéierten Fusiounsprotein duerch Ionaustauschschromatographie.

D'Spaltung vum Hybridprotein gëtt duerch déi gemeinsam Hydrolyse vum Trypsin an der Carboxypeptidase B an engem Gewiichtsverhältnis vum Hybridprotein, Trypsin an der Carboxypeptidase B 4000: 0,6: 0,9 duerchgefouert.

Purificatioun vun Insulin gëtt duerch hydrophobesch Chromatografie oder Reverse-Phase High Performance Flëssegkeetchromatographie gefollegt duerch Gelfiltratioun, an d'Isolatioun vun Insulin duerch Kristalliséierung an der Präsenz vun Zinksalzer. D'Erfindung erlaabt de Prozess ze reduzéieren fir genetesch konstruéiert mënschlecht Insulin ze kréien an säin Ausgang ze erhéijen.

D'Erfindung bezitt sech op d'Feld vun der Biotechnologie, a besonnesch op d'Produktioun vun genetesch manipuléierten mënschlechen Insulin fir d'Produktioun vun Medikamenter, déi an der Behandlung vun Diabetis mellitus benotzt ginn.

Ënner Berücksichtegung vun den Haaptleeschtunge vun der moderner Diabetologie an de Empfehlungen vun der Weltgesondheetsorganisatioun, hunn d'europäesch Länner bis 2001 den Iwwergank zum Gebrauch vu mënschlechen Insulin ofgeschloss. An dëser Hisiicht ass d'Entwécklung vu Methoden fir Insulin ze produzéieren mat Hëllef vun der DNA Rekombinant Technologie eng dréngend Aufgab.

Eng bekannte Method fir genetesch konstruéiert mënschlecht Insulin ze produzéieren, wat aus der Kultivatioun vun engem Produzentstamm E. Coli besteet, proinsulin ze produzéieren, enthält eng Sequenz vun zwee syntheteschen IgG-bindende Beräicher vum Staphylokokkprotein A.

D'Methode besteet an Zerstéierung vu Bakterienzellen, Inklusioun Taurus mat Proinsulin ze kréien, Opléisung vun Inklusioun Taurus, oxidativ Sulfitolyse vum Proinsulin, senger Renaturéierung, Reinigung vum renaturéierten Protein duerch Affinitéitskromatographie, Spaltung vu Proinsulin mat proteolytesche Enzymen (Trypsin an Carboxypeptidase B) a Schlussphaseinsuléierung vun Insulin chromatografie (Nilson J., Jonasson P., Samuelsson E., Stahl S., Uhlen M. "Integréiert Produktioun vu mënschlechen Insulin a säin C-Peptid", Journal of biotechnology, 1996, v. 48, S. 241-250) An.

D'Nodeeler vun dëser Method sinn déi héich Käschte vum Produkt an d'Benotzung bei der Produktioun vun Insulinmëttelen, déi am Zilprodukt präsent sinn.

Eng bekannte Method fir genetesch konstruéiert mënschlecht Insulin ze produzéieren, wat besteet an d'Zellen vun der Produzentstamm E.

Coli DN5 a / pVK100, zerstéiere Bakterienzellen duerch Ultrasonic Desintegratioun, trennen Inklusiounskierper, déi den Hybridprotein aus Waasserléisleche Gëftstoffer enthalen duerch Zentrifugatioun, léisen d'Inklusiounskierper an engem Puffer mat 8 M Harnstoff, 1 mM Dithiothreitol, 0,1 M Tris-HCl, pH 8,0, fir 12-16 Stonnen.

Insoluble Gëftstoffer ginn duerch Zentrifugéierung geläscht, duerno ass d'Konzentratioun vum Dithiothreitol op 10 mM eropgaang an Disulfidbindunge ginn op 37 ° C fir 1 Stonn restauréiert. D'Léisung gouf 5 Mol mat kale Waasser verdünnt, op pH 4,5 ugepasst an fir 2 Stonnen bei 4 ° C incubéiert fir e Nidderschlag ze bilden.

Den Nidderschlag, deen den Hybridprotein enthält, gouf duerch Zentrifugatioun getrennt a renaturéiert, séier a kale Waasser bei engem pH vun 10-12 opgeléist, duerno gouf et mat 10 mM Glycinpuffer, pH 10,8, verdënntem an iwwer Nuecht bei 4 ° C gehalen. No der Ultrafiltratioun gouf d'Léisung mat enger Gelfiltratioun op enger Sephadex G-50 Kolonn ënnerworf an mat 10 mM Glycinpuffer geelutéiert.

Frakturen, déi d'Fusiounsprotein enthalen, gi gesammelt, ultrafiltréiert a gefriessert. De resultéierende Fusiounsprotein gëtt opgeléist an 0,08 M ​​Tris-HCl Puffer, pH 7,5, zu enger Konzentratioun vun 10 mg / ml a gekollt gläichzäiteg mat Trypsin an Carboxypeptidase B (Verhältnis vu Carboxypeptidase B: Trypsin: Fusiounsprotein 0.3: 1: 10) bei 37 ° C fir 30 Minutten.

Duerno fügen Isopropanol op 40%. D'Mëschung gëtt op enger DEAE-Sephadex A-25 Kolonn chromatograféiert an eluéiert mat 0,05 M Tris-HCl Puffer, pH 7,5 mat 40% Isopropanol mat engem linearem Gradient vu Natriumchlorid vun 0 bis 0,1 m. No der Entfernung vum Isopropanol ass d'Konzentratioun vu Natriumchlorid erop op 25%, verännert den pH op 2,0 a sammelt Insulin Ausfäll.

(Chen J.-Q., Zhang H.-T., Hu M.-N., Tang J.-G., "Produktioun vu mënschlechen Insulin an engem E. Coli System mat met-lys-Mënsch proinsulin wéi ausgedréckt Virgänger "Applied Biochemistry and Biotechnology, 1995, v. 55, S. 5-15).

D'Nodeeler vun dëser Method beinhalt d'Verwäertung vun Gelfiltréierung an den initialen Etappe, déi bedeitend Quantitéiten vu Sorbent an eng grouss Zuel vun Enzymen erfuerdert, déi an der Spaltung vum Hybridprotein benotzt ginn.

Eng bekannte Method fir genetesch konstruéiert mënschlecht Insulin ze produzéieren, abegraff Kultivatiounsstamm vun Escherichia coli JM109 / pPINS07, Zerstéierung vun Bakterienzellen duerch Desintegratioun, Trennung vun Inklusiounskierper mat engem Hybridprotein, opgeléist an engem Puffer mat Harnstoff an Dithiothreitol, Renaturéierung a Puréierung vum renaturéierten hybridiséierte Protein Nidderschlag vun Gëftstoffer Verbindungen a 40% Isopropanol gefollegt vu Chromatographie op KM-Sepharose, seng sequentiell Spaltung mat Trypsin an Carboxypeptidase B, während d'Produkter trypsinolysis gëtt op SP-Sepharose chromatograféiert, equilibréiert mat 0,03-0,1 M Ammoniumacetatpuffer pH 5,0-6,0 enthale 6 M Harnstoff, mat Proteinelutioun mat engem linearem Gradient vun Natriumchlorid vun 0 bis 0.5 M am Start Puffer, an d'Insulin Fraktioun kritt nom Spaltung mat Carboxypeptidase B gouf duerch Reverse Phas High Performance Flëssegkeetchromatographie (RP HPLC) gefollegt vu Gelfiltréierung (Pat. RF Nr. 2141531, MKI C12P 21/02, publ. 1999)

D'Nodeeler vun der Method enthale d'Benotzung vu bedeitende Mengen Harnstoff an organeschen Léisungsmëttelen op der Stadium vun der Rengegung vum Hybridprotein.

Diabetis Expert

Virun der Notzung vun Insulin war d'Liewenserwaardung vun engem Patient mat Diabetis mellitus net méi wéi 10 Joer. D'Erfindung vun dësem Medikament huet Millioune Patiente gespuert. Mënsch genetesch Ingenieur Insulin ass déi lescht Fortschrëtter an der Wëssenschaft.

D'Resultat vu ville Joeren haarder Aarbecht

Virun der Erfindung vun der Gentechnik (rekombinant) Virbereedung, gouf Insulin aus der Bauchspaicheldrüs vu Rind a Schwäin isoléiert.

Den Ënnerscheed tëscht porzin Insulin a Mënsch ass nëmmen eng Aminosaier

D'Nodeeler vun dëser Method fir Medikament ze kréien:

• d'Komplexitéit vum Späicheren an Transport vu biologesche Rohmaterialien,
• net genuch Béischten
• Schwieregkeeten verbonne mat der Allokatioun a Puréierung vun Bauchspeicheldrüs Hormon,
• héije Risiko vun allergesche Reaktiounen.

Mat der Synthese vum natierlechen Mënsch Insulin am Bioreaktor am Joer 1982 huet eng nei biotechnologesch Ära ugefaang. Wann am Sonnenopgang vun Insulintherapie, d'Zil vu Wëssenschaftler nëmmen d'Iwwerliewe vum Patient war, an eiser Zäit d'Entwécklung vun neie Medikamenter zielt fir nohalteg Kompensatioun fir d'Krankheet ze erreechen. D'Haaptziel vun der wëssenschaftlecher Fuerschung ass d'Liewensqualitéit vun engem Patient mat Diabetis ze verbesseren.

Modern Technik

Aarte vun Drogen, ofhängeg vun der Method vun der Virbereedung:

Wat geschitt am Kierper no Drogenverwaltung?

Verbonnen mat dem Rezeptor vun der Zellmembran, formt Insulin e Komplex dat folgend Prozesser implementéiert:

1. Verbessert den intrazelluläre Glukosentransport an erliichtert seng Absorptioun.
2. Fördert d'Verëffentlechung vun Enzymen, déi an der Veraarbechtung vu Glukos involvéiert sinn.
3. Et reduzéiert den Taux vun der Glycogenbildung an der Liewer.
4. Stimuléiert Fett a Protein Metabolismus.

Am Fall vun subkutane Verwaltung fänkt Insulin op 20-25 Minutten ze handelen. D'Dauer vum Medikament vu 5 bis 8 Stonnen. Et gëtt weider vum Enzym Insulinase gespalt an an der Pipi ausgeschloss. De Medikament geet net iwwer d'Placenta a geet net an d'Muttermëllech.

Wéini gëtt genetesch manipuléiert Insulin verschriwwen?

Wann dréngend Hëllef gebraucht gëtt

Genetesch konstruéiert mënschlecht Insulin gëtt an de folgende Fäll benotzt:

1. Typ 1 oder Typ 2 Diabetis. Et gëtt als onofhängeg Behandlung oder a Kombinatioun mat aneren Drogen benotzt.
2. Mat Resistenz géint mëndlech hypoglycemesch Agenten.
3. Mat Diabetis bei schwangeren Fraen.
4. Am Fall vu Komplikatiounen aus den Nieren an der Liewer.
5. Wann Dir op verlängert-handelen Insulin schalt.
6. An der preoperativer Period.
7. Am Fall vu liewensbedroende Bedéngungen (hyperosmolar oder ketoacidotesch Koma).
8. An Noutsituatiounen (virun der Gebuert, mat Verletzungen).
9. Wann et dystrophesch Haut Läsionen sinn (Geschwüren, Furunculose).
10. Behandlung vun Diabetis géint den Hannergrond vun der Infektioun.

Mënsch genetesch Ingenieur Insulin ass gutt toleréiert a verursaacht keng allergesch Reaktiounen, well et ass komplett identesch mat dem natierlechen Hormon.

Konstant Iwwerwaachung ass wichteg!

Et ass verbueden Medikamenter ze verschreiben am Fall vun:

• Bluttzocker erofsetzen
• Iwwerempfindlechkeet fir den Drogen.

An den éischten Deeg no der Ernennung vum Medikament ass eng suergfälteg Iwwerwaachung vum Patient néideg.

Nebenwirkungen

Urticaria Gefor! Dem Quincke seng Ödem!

An seltenen Fäll, wann Dir Insulin benotzt, sinn déi folgend Komplikatioune méiglech:

• allergesch Reaktiounen (Urtikaria, Quincke's Ödeme, Jucken vun der Haut),
• eng schaarf Ofsenkung vum Bluttzocker (entwéckelt wéinst Oflehnung vum Medikament vum Kierper oder am Fall vun engem immunologesche Konflikt),
• schiedegt Bewosstsinn
• a schlëmme Fäll ass d’Entwécklung vun hypoglycemesche Koma méiglech,
• duuschtereg, dréchene Mond, Lethargy, Appetitverloscht,
• Hyperglykämie (wann een dat Medikament géint en Hannergrond vun enger Infektioun oder Féiwer benotzt),
• Gesiichtsrottheet
• lokal Reaktiounen am Gebitt vun der Verwaltung (Verbrenne, Jucken, Atrophie oder Prolifératioun vu subkutane Fett).

Heiansdo gëtt Adaptatioun zum Medikament begleet vu Stéierunge wéi Schwellungen a Gesiichterbehënnerung. Dës Manifestatiounen verschwannen normalerweis no e puer Wochen.

Wéi fannen ech genetesch manipuléiert Insulin an enger Apdikt?

D'Medizin ass verfügbar an der Form vun enger Léisung fir parenteral Verwaltung:

Et ass net schwéier eng Insulinpräparatioun ze wielen andeems d'individuell Charakteristike vum Patient berücksichtegt ginn.

Benotzungsconditiounen

Déi meescht dacks gëtt subkutane Verwaltung vun Insulin benotzt.

An dréngende Fäll ass de Medikament intravenös verwalt.

A schwéieren Zoustand vum Patient

Och en Diabetiker mat Erfahrung kann e Feeler maachen wann Dir d'Drogen benotzt.

Fir Komplikatiounen ze vermeiden ass et néideg:

1. Virum Gebrauch, kontrolléiert den Verfallsdatum vun der Medizin.
2. Beim Empfeelungsempfehlungen beobachten: Ersatzfläschen sollen am Frigo gespeichert ginn. Déi entwéckelt Fläsch kann bei Raumtemperatur an enger donkeler Plaz gelagert ginn.
3. Gitt sécher déi richteg Doséierung ze erënneren: liest nach weider de Dokter Rezept.
4. Virun der Injektioun ass et néideg Luft aus der Sprëtz ofzeginn.
5. D'Haut sollt propper sinn, awer et ass ongewollt d'Alkohol fir d'Veraarbechtung ze benotzen, well et d'Effektivitéit vum Medikament reduzéiert.
6. Wielt déi bescht Plaz fir d'Injektioun. Wann se ënner der Haut vum Bauch agefouert gëtt, handelt de Medikament méi séier. Méi lues Absorptioun vum Insulin wann se an d'Gluteal klappt oder op d'Schëller agefouert gëtt.
7. Benotzt d'ganz Surface (Verhënnerung vu lokalen Komplikatiounen). D'Distanz tëscht Injektiounen soll op d'mannst 2 cm sinn.
8. Huelt d'Haut an der Krëpp fir d'Risiko ze reduzéieren an de Muskel z'erreechen.
9. Bréngt d'Sprëtz ënner der Haut an engem Winkel, fir datt d'Medizin net leeft.
10. Wann Dir an de Bauch sprutzt, gëtt kuerz-handlungsräich Insulin 20 Minutte virum Iessen geliwwert. Am Fall vun enger Wiel vun enger Schëller oder Hënner - drësseg Minutte virum Iessen.

Kombinatioun mat aneren Drogen

Oft mat Diabetis huelen de Patient verschidde Medikamenter. D'Kombinatioun mat aneren Drogen kann den therapeuteschen Effekt op genetesch manipuléierten Insulin beaflossen.

Fir Komplikatiounen ze vermeiden, musst Dir wëssen:

Iwwerdosis

An e puer Fäll féiert Insulinverwaltung zu enger plötzlecher Ofsenkung vum Bluttzocker. De Problem entstinn dacks wéinst enger falscher Dosisauswiel.

Ufankssymptomer vun Hypoglykämie:

• schwaach
• bleift vun der Haut
• Besuergnëss Staat
• Schwindel
• Desorientéierung
• Nahrheit vun den Waffen, Been, Zong a Lippen,
• trembling Glieder
• kale Schweess
• e staarkt Gefill vu Hunger
• Kappwéi.

Tremor; plötzlech Verschlechterung am Wuelbefannen

Wann Dir esou Symptomer an Iech selwer bemierkt, musst Dir séier eppes iesst mat liicht verdaulleche Kuelenhydrater. Et kann Kichelcher, Candy, e Stéck Zocker oder wäiss Brout sinn. Séiss Téi hëlleft an esou Situatiounen.

Wann d'Konditioun verschlechtert, musst Dir eng Ambulanz ruffen. Hypoglykämie kann zu engem Koma oder Doud vum Patient resultéieren.

Ass rekombinant Insulin geféierlech?

Moien Rekombinant Insulin ass net anescht wéi natierlech. Fir et ze kréien, gi genetesch modifizéiert Bakterien benotzt.

Mat Hëllef vu gentechnologeschen Technologien gëtt eng rekombinant DNA enthale mam Insulingen an d'Zell vun E. coli implantéiert. Genetesch modifizéiert Organismen multiplizéieren a produzéieren en Hormon. De Medikament ass ganz effektiv an huet en héije Grad vun der Rengung.

Insulin Deel II. Mikrobiologesch Insulinproduktioun

affinitéitskomponent - wesentlech d'Isolatioun vum Hybridprotein erliichtert.

An dësem Fall kënne béid vun dëse Komponente gläichzäiteg an der Zesummesetzung vum Hybridprotein präsent sinn.

Ausserdeem, wann Dir Hybridproteine ​​kreéiert, kann de Prinzip vun der Multidimensionalitéit benotzt ginn (dat heescht, verschidde Kopien vum Zilpolypeptid sinn am Hybridprotein präsent), wat d'Ausbezuele vum Zilprodukt wesentlech kann erhéijen.

2 Ausdrock vu Proinsulin an E. coli Zellen ..

An der Aarbecht hunn d'Auteuren Stamm JM 109 N1864 mat enger Nukleotid-Sequenz an de Plasmid agebaut, deen en Hybridprotein ausdréckt, deen aus linearem Proinsulin an e Fragment vum Staphylococcus aureus Protein A besteet, deen un säin N-Uschloss duerch d'Methioninreste verbonne war.

D'Kultivatioun vun der gesättigte Biomass vun Zellen vum rekombinantem Stamm bitt den Ufank vun der Produktioun vun engem Hybridprotein, d'Isolatioun an d'Seksequent Transformatioun vun deem a Réier féiert zum Insulin.

Eng aner Grupp vu Fuerscher krut e rekombinant Protein am bakterielle Ausdrockssystem vun enger Fusioun, déi aus mënschleche Proinsulin besteet an e Polyhistidin Schwanz, deen et duerch e Methioninreste verbonne war. Et gouf mat Hëllef vu Chelatchromatographie op Ni-Agarosekolonnen aus Inklusiounskierper isoléiert a mat Cyanogenbromid verdaut.

Kartéieren a Massespektrometresch Analyse vum gewonnenen Proinsulin purifizéiert duerch Ionaustauschschromatographie op Anionaustauschharz a RP (ëmgedréit Phas) HPLC (Héichleistung Flëssegkeetchromatographie) huet d'Präsenz vun Disulfidbrécke gewisen entsprécht disulfid Brécke vum nativen Mënsch Proinsulin. De Pabeier bericht iwwer d'Entwécklung vun enger neier, verbesserte Method fir mënschlecht Insulin ze produzéieren duerch genetesch Ingenieuren an prokaryoteschen Zellen. D'Autoren hunn erausfonnt datt dat resultéierend Insulin a senger Struktur a biologescher Aktivitéit identesch ass mam Hormon dat aus der Bauchspaicheldrüs isoléiert ass.

Viru kuerzem gouf opmierksam gemaach fir d'Prozedur ze vereinfachen fir rekombinant Insulin duerch genetesch Ingenieuren ze produzéieren. Also hunn d'Auteuren e Fusiounsprotein kritt deen aus dem Leaderpeptid vum Interleukin 2 befestegt ass, deen un den N-Uschloss vum Proinsulin duerch d'Lysinreschter verbonne war.

De Protein war effizient ausgedréckt a lokaliséiert an Inklusiounskierper. No der Isolatioun gouf de Protein mat Trypsin verdaut fir Insulin a C-Peptid ze produzéieren. Eng aner Grupp vu Fuerscher huet sech op ähnlech Manéier gehandelt.

E Fusiounsprotein besteet aus Proinsulin an zwee syntheteschen Beräicher vum Staphylokokk A Proteinbindende IgG war lokaliséiert an Inklusiounskierper, awer hat e méi héicht Ausdrockniveau. De Protein gouf mat Affinitéitskromatographie mat IgG isoléiert a mat Trypsin a Carboxypeptidase B veraarbecht.

De resultéierend Insulin a C-Peptid goufe vu RP HPLC gereinegt. Beim Schafe vu geschmoltenem Strukturen ass d'Massverhältnis vum Trägerprotein an Zilpolypeptid ganz bedeitend.

Also beschreift d'Aarbecht de Bau vu Fusiounsstrukturen, wou e Proteinbindende Mënsch Serum Albumin als Carrier Polypeptid benotzt gouf. Ee, dräi a siwe C-Peptide waren derbäi.

C-Peptidë goufen op Kappschwanzbasis mat Aminosauerraumberäicher verbonne mat der Sfi I Restriktiounssäit an zwee Argininreschter am Ufank an um Enn vum Spacer fir spéider Proteinsplittung mat Trypsin verbonnen. HPLC vun de Spaltungsprodukter huet gewisen datt d'Spaltung vum C-Peptid quantitativ ass, an dëst erlaabt d'Benotzung vu multimeren syntheteschen Genen fir Zil Polypeptiden op enger industrieller Skala ze kréien.

D'Wierk beschreift d'Preparatioun vum Proinsulin Mutant, deen den Ersatz vun der Arg32Tyr enthält. Wann dëst Protein mat Trypsin an der Carboxypeptidase B gekollt gouf, gouf gebierteg Insulin an e C-Peptid enthale mat der Tyrosinreschter. Déi lescht, nom Etiketten 125I, gëtt aktiv an Radioimmunoassay benotzt. 3 Puréierung vun Insulin.

Insulin fir d'Produktioun vun Drogen geduecht, muss héich Puritéit sinn. Dofir ass eng héich effektiv Kontroll vun der Rengheet vun de Produkter déi an all Etapp vun der Produktioun kritt goufen. Virdru goufen RP an IO (Ionaustausch) HPLC benotzt fir Proinsulin-S-Sulfonat, Proinsulin, eenzel A- a B-Ketten ze charakteriséieren, an hir S-Sulfonate.

Besonnesch Opmierksamkeet gëtt och fir d'fluoreszent Insulinderivat bezuelt. An der Aarbecht hunn d'Auteuren d'Uwendbarkeet an d'Informativitéit vu chromatografesche Methoden an der Analyse vu Produkter an alle Stadien vun der mënschlecher Insulinproduktioun ënnersicht an e Schema vun der chromatografescher Operatioun opgesat fir effektiv déi resultéierend Produkter ze trennen.

Zousätzlech ginn Approche entwéckelt fir d'Prozesser ze automatiséieren an ze beschleunegen fir d'Rengheet an d'Quantitéit un Insulin ze bestëmmen.

De Pabeier bericht iwwer Studien iwwer d'Méiglechkeet vu RP Flëssegkeetchromatographie mat der elektrochemescher Detektioun fir d'Bestëmmung vun Insulin ze benotzen, an eng Methodologie fir d'Bestëmmung vun Insulin aus der Insel vu Langerhans duerch Immunoaffinitéitschromatografie mat spektrometrescher Detektioun gouf entwéckelt.

An der Aarbecht gouf d'Méiglechkeet fir séier Mikrobestëmmung vun Insulin mam Kapillaren Elektrophorese mat Laser-Fluoreszenzdetektioun z'ënnersichen. D'Analyse gëtt gemaach andeems en zu enger Probe e bekannte Betrag vun Insulin mam Phenylisothiocyanat (FITC) an e Fab Fragment vun monoklonalen Insulinantikörper addéiert. Etikettéiert a reegelméisseg Insuline reagéiere kompetitiv mam Fab Komplex. De FITZ-labeléierte Insulin a säi Komplex mam Fab ginn an 30 Sekonne getrennt.

Viru kuerzem ass eng grouss Zuel vu Wierker fir d'Verbesserung vun Insulinproduktiounsmethoden gewidmet, souwéi d'Schafung vun Doséierungsformen op der Basis.

Zum Beispill, an den USA ginn hepatospesifesch Insulinanaloger patentéiert, strukturell anescht wéi natierlecht Hormon wéinst der Aféierung vu verschiddene Aminosaierreschter op Positiounen 13-15 an 19 vun der A Kette an op der Positioun 16 vun der B Kette.

Déi gewonnen Analoga ginn a verschiddene parenteral (intravenös, intramuskulär, subkutan), intranasal Doséierungsformen oder Implantatioun an der Form vu speziellen Kapselen an der Behandlung vun Diabetis mellitus benotzt. Besonnesch Relevanz ass d'Schafung vun Doséierungsformen ouni Injektioun verwaltet.

De Pabeier bericht iwwer d'Schafung vun engem makromolekuläre oralen Administratiounssystem, deen Insulin immobiliséiert ass am Volume vun engem Polymer Hydrogel geännert mat proteolyteschen Enzyminhibitoren. D'Effektivitéit vun sou engem Medikament ass 70-80% vun der Effektivitéit vum subcutanen agefouerten natierlechen Insulin.

An engem anere Wierk gëtt e Medikament kritt duerch eng Etapp Inkubatioun vun Insulin mat roude Bluttzellen, geholl an engem Verhältnis vu 1-4: 100, an der Präsenz vun engem verbindlechen Agent.D'Autoren berichten den Empfang vun engem Medikament mat enger Aktivitéit vun 1000 Eenheeten / g, komplett Erhaalung vun der Aktivitéit no mëndlecher Verwaltung a Lagerung fir e puer Joer an enger lyophiliséierter Form.

Zousätzlech fir nei Medikamenter an Doséierungsformen ze kreéieren baséiert op Insulin, nei Approche ginn entwéckelt fir de Problem vun Diabetis ze léisen.

Also hunn d'Auteuren transfizéiert GLUT2 Glukosetransporterprotein cDNA virdru stabil mat transfected mat Insulin cDNA vu HEP G2 ins Zellen.

An der gewonnener HEP G2 Insgl Klone stimuléiert Glukos no normaler Insulinsekretioun a potenzéiert d'Sekretoresch Äntwert op aner Sekretiounsstimulanten.

Ënner immunoelectron Mikroskopie goufen Insulin-enthale Granules an den Zellen fonnt, déi morphologesch ähnlech wéi Granulat an de B-Zellen vun den Inselen vu Langerhans sinn. D'Méiglechkeet e "kënschtlechen B-Zell" ze benotze vun der genetescher Ingenieursbehandlung fir d'Behandlung vun Diabetis mellitus Typ 1 ass aktuell eescht diskutéiert.

Nieft der Léisung vu praktesche Probleemer ginn d'Mekanismen vun der Handlung vum Insulin, souwéi strukturell a funktionell Bezéiungen an der Molekül. Eng vun de Fuerschungsmethoden ass d'Schafung vu verschiddenen Derivate vun Insulin an der Studie vun hire physicochemeschen an immunologeschen Eegeschaften 23, 24.

Wéi uewen erwähnt, sinn eng Zuel vu Methoden fir d'Produktioun vun Insulin baséiert op der Produktioun vun dësem Hormon a Form vun engem Virgänger (proinsulin), gefollegt vun enzymatesche Spaltung un Insulin a C-Peptid. De Moment ass d'Präsenz vu biologescher Aktivitéit fir den C-Peptid gewise ginn, wat et méiglech mécht et fir therapeutesch Zwecker zesumme mam Insulin ze benotzen.

An de folgenden Artikele vun dëser Serie ginn déi physikalesch-chemesch a biologesch Eegeschafte vum C-Peptid, wéi och Methode fir hir Virbereedung berücksichtegt.

Biotechnologie an der Fabrikatioun vun Drogen

Interessant sinn d'Entwécklungen fir eng 20K Versioun vum STGh ze kréien. Eng verspriechend Aufgab ass et net nëmme verschidde Forme vu STH ze kréien an ze studéieren, awer och STH immobiliséiert fir de verlängerten Handlung vum Hormon ze kréien. Eng originell Method gouf entwéckelt fir immobiliséiert STHch mat enger längerer Handlung ze kréien.

Parallel mat der Produktioun vu STH gouf eng originell integréiert Technologie fir d'Produktioun vun Hormonen vun der Adenohypophysis, all Speziesspezifesch abegraff, an e puer vun hiren Ännerungen aus GST erstallt. Vu grousser Wichtegkeet ass d'Ëmsetze vun engem geziilte Programm fir en therapeutescht Medikament STH (Somatogen) ze kreéieren, kritt duerch genetesch Ingenieurswiesen.

Klinesch Erfarung huet gewisen datt d'Optimiséiere vun der Behandlung vu Stunting et ubruecht ass am Arsenal verschidden ähnlech pharmazeutesch Virbereedungen duerch verschidden Technologien oder souguer Methoden ze kréien (MF, Ausomatin, Somatogen).

Langfristeg Behandlung (fir Joeren) mat enger Virbereedung vun HSCH verursaacht eng Ofsenkung vun der Empfindlechkeet an dësem am Kierper.

Deelweis kann dëst d'Resultat vun der Bildung vun Antikörper sinn, awer den Haaptgrond muss um Niveau vun de Rezeptoren an der Veraarbechtung vum Hormon gesicht ginn.

Schafft mat GST, souwéi ëmfaassend Studien iwwer geheime Hormonen an hir verschidde Formen et méiglech d'Systemer vun der Natur ze studéieren an se besser ze verstoen. D'Existenz vu verschiddene gebiertege Forme vu STH am Kierper weist hir Machbarkeet a méiglech Notzung, zum Beispill, an enger Klinik.

Wann Dir nei STHch Präparate kreéiert, ass et fir d'éischt noutwendeg ze konzentréieren op déi natiirlech natierlech Formen vum Hormon an, wa passend, se duerch genetesch Ingenieurs ze skalaéieren, sou wéi et mam STHch Monomer gemaach gëtt.

An der Produktioun vu STHch Virbereedungen aus GST gëtt eng ëmfaassend industriell Technologie fir d'Produktioun vun aneren Hormone vun der Adenohypophysis (LGH, FSHch, TTGch an anerer) erfollegräich implementéiert. Et ass noutwendeg d'Produktioun ze optimiséieren andeems se nei fortgeschratt Methoden aféieren (Affinitéitschromatographie, etc.)

), kréien ganz reng Hormone mat integréierter Technologie.

Et ass noutwendeg fir d'Produktioun an d'Benotzung vu Sets vun der Immunomikroanalyse vun den Hormonen vun der Adenohypophyse fir Diagnos an d'Biotechnologie auszebauen, d'reguléiert Produktioun vu standardiséierte Antikörper vu verschiddene Skalen auszeféieren, nei STHch-Präparaten ze kreéieren, dorënner immobiliséiert.

De Fakt datt STH Protein, Fett, a Mineralmetabolismus beaflosst, handelt um Zellenniveau ouni Zielorgan, an ass anabolesch, gëtt grouss Perspektiven fir säi Gebrauch fir Reparaturprozesser ze stimuléieren a verschidde Krankheeten ze behandelen. Eng méi breet Etude vun dësen Themen, wéi och d'Méiglechkeet fir verschidde verännert Formen a Varianten vu STGch ze benotzen, ass eng dréngend a verspriechend Aufgab.

Insulin an der Biotechnologie kréien

Insulin, dat Peptidhormon vun den Insele vu Langerhans vun der Bauchspaicheldrüs, ass d'Haaptbehandlung fir Diabetis. Dës Krankheet gëtt duerch Insulinmangel verursaacht a manifestéiert sech duerch eng Erhéijung vum Bluttzocker. Bis viru kuerzem ass Insulin aus der Bauchspaicheldrüs vun enger Stier an engem Schwäin kritt.

D'Medikament ënnerscheet sech vum mënschlechen Insulin duerch 1-3 Aminosyresubstitutiounen, sou datt et eng Bedrohung vun allergesche Reaktiounen war, besonnesch bei Kanner. Déi verbreet therapeutesch Notzung vun Insulin gouf duerch seng héich Käschte a limitéiert Ressourcen beschränkt.

Duerch chemesch Modifikatioun gouf Insulin vun den Déieren ofgezeechent vun der Mënschheet z'ënnerscheeden, awer dëst bedeit eng zousätzlech Erhéijung vum Präis vum Produkt.

Zënter 1982 huet d'EliLilly genetesch konstruéiert Insulin produzéiert baséiert op der separater Synthese vun E. coli A a B Ketten. D'Käschte vum Produkt sinn däitlech erofgaang, dat resultéierend Insulin ass identesch mat dem Mënsch. Zënter 1980 gouf et Berichter an der Press iwwer d'Klonen vum Proinsulin-Gen, en Hormonpräziser deen an eng reife Form mat limitéierter Proteolyse transforméiert.

Encapsulation Technologie gëtt och fir d'Behandlung vun Diabetis applizéiert: Bauchspaicheldrüs Zellen an enger Kapsel, eemol am Kierper vum Patient agefouert, produzéieren Insulin am Joer.

Integréiert Genetik huet follikelstimuléierend a luteiniséierend Hormonen gestart. Dës Peptide sinn aus zwee Ënnerunitéiten. Op der Agenda ass d'industriell Synthese vun Oligopeptid Hormonen vum Nervensystem - Enkephaline, gebaut aus 5 Aminosaierreschter, an Endorphine, Analoge vu Morphin.

Wann rational benotzt, ginn dës Peptide Schmerz erliichtert, schaaft eng gutt Stëmmung, erhéijen d'Aarbechtsfäegkeet, fokusséieren d'Opmierksamkeet, verbesseren d'Erënnerung, a setzen an Uerdnung Schlof a Wakefulness.

E Beispill vun der erfollegräicher Uwendung vu geneteschen Ingenieurmethoden ass d'Synthese vu p-Endorphin mat der Hybrid Protein Technologie uewen beschriwwen fir en anert Peptidhormon, Somatostatin.

Methoden fir mënschlecht Insulin ze produzéieren:

Historesch ass den éischte Wee fir Insulin fir therapeutesch Zwecker ze kréien, d'Isolatioun vun Analoga vun dësem Hormon aus natierlechen Quellen (Insele vun der Bauchspaicheldrüs vu Rëndfleesch a Schwäin).

An den 20er vum leschte Joerhonnert gouf festgestallt datt Boverie a Schwäin Insuline (déi am mënschsten Insulin an hirer Struktur an Aminosauer Sequenz am noosten sinn) Aktivitéit am mënschleche Kierper vergläichen am Verglach zum mënschlechen Insulin. Duerno gouf Bull oder Schwäin Insulin fir eng laang Zäit benotzt fir Patiente mat Typ I Diabetis ze behandelen.

Awer no enger Zäit gouf ugewisen datt an e puer Fäll Antikörper géint Boverie a Porcine Insulin am mënschleche Kierper ufänken ze accumuléieren, an doduerch hir Effekt negéieren.

Engersäits ass ee vun de Virdeeler vun dëser Method fir Insulin ze kréien ass d'Disponibilitéit vu Matière premièren (Rëndfleesch a Schwäin Insulin kënne ganz einfach a grousse Quantitéite kritt ginn), wat eng entscheedend Roll gespillt huet bei der Entwécklung vun der éischter Method fir de Mënsch Insulin ze produzéieren.Dës Method gëtt semi-synthetesch genannt.

An dëser Method fir mënschlecht Insulin ze produzéieren, gouf Schweineinsulin als Ressource benotzt. D'C-terminalt Oktapeptid vun der B Kette gouf aus gereinegtem Porzininsulin gekollt, duerno ass de C-terminaler Oktapeptid vum mënschlechen Insulin synthetiséiert.

Duerno gouf et chemesch befestegt, d'Schutzgruppen goufen ewechgeholl an dat resultéierend Insulin gouf gereinegt. Beim Test vun dëser Method fir Insulin ze kréien, gouf déi komplett Identitéit vum Hormon, dat dem Mënsch Insulin kritt huet gewisen.

Déi Haaptschwieregkeet vun dëser Methode ass déi héich Käschte vum resultéierende Insulin (och elo ass déi chemesch Synthese vum Oktapeptid eng deier Freed, besonnesch op industrieller Skala).

De Moment gëtt de Mënsch Insulin haaptsächlech op zwou Weeër kritt: duerch Modifizéierung vum Porzin Insulin mat der synthetesch-enzymatescher Method an duerch déi genetesch Ingenieursmethod.

Am éischte Fall ass d'Methode baséiert op der Tatsaach datt Schweineinsulin aus mënschlechen Insulin an enger Substitutioun am C-Uschloss vun der Ala30Thr B Kette ënnerscheet.

Den Ersatz vun Alanin mat Threonin gëtt duerch Enzymkatalyséiert Spaltung vun Alanin duerchgefouert an d'Zousatz vun engem Threoninreschter, geschützt vun der Carboxygrupp amplaz, wat an engem groussen Iwwerschoss an der Reaktiounsmëschung präsent ass. Nom Spaltung vun der Schutz O-tert-Butyl Grupp gëtt e Mënsch Insulin kritt.

Insulin war deen éischte Protein, dee fir kommerziell Zwecker mat Hëllef vun der rekombinanter DNA Technologie kritt gouf. Et ginn zwou Haaptmethoden fir genetesch konstruéiert mënschlecht Insulin ze produzéieren.

Am éischte Fall gi separat (verschidde Produzente Stämme) fir béid Ketten kritt, gefollegt vu Foldung vun der Molekül (Bildung vun Disulfidbrécke) an Trennung vun Isoformen.

An der zweeter Produktioun a Form vun engem Virgänger (proinsulin) gefollegt vun enzymatescher Verdauung mat Trypsin an Carboxypeptidase B an déi aktiv Form vum Hormon.

De Moment ass et am léifsten Insulin an der Form vun engem Virgänger ze kréien, wat déi korrekt Zoumaache vun Disulfidbrécke garantéiert (am Fall vun enger separater Virbereedung vu Ketten, successive Zyklen vun denaturéierung, Trennung vun Isoformen an Renaturéierung ginn duerchgefouert).

Mat béide Approche ass et méiglech souwuel déi Startkomponenten (A- a B-Ketten oder Proinsulin) individuell ze kréien, an als Deel vun Hybridproteine. Zousätzlech zu den A a B Ketten oder Proinsulin, kënne Hybrid Proteinen enthalen:

1) Carriereprotein - wat den Transport vun engem Hybridprotein an de periplasmesche Raum vun enger Zelle oder Kulturmedium ubitt,

2) Affinitéitskomponent - wesentlech d'Isolatioun vum Hybridprotein erliichtert.

An dësem Fall kënne béid vun dëse Komponente gläichzäiteg an der Zesummesetzung vum Hybridprotein präsent sinn. Ausserdeem, wann Dir Hybridproteine ​​kreéiert, kann de Prinzip vun der Multidimensionalitéit benotzt ginn (dat heescht, verschidde Kopien vum Zilpolypeptid sinn am Hybridprotein präsent), wat d'Ausbezuele vum Zilprodukt wesentlech kann erhéijen.

Ausdrock vu Proinsulin an E. coli Zellen ..

De Stamm JM 109 N1864 mat enger Nukleotidsekvens, déi e Fusiounsprotein ausdréckt, deen aus engem linearem Proinsulin besteet an e Proteinfragment A vum Staphylococcus aureus verbonne mat senger N-Uschloss duerch d'Methioninreschter, gouf benotzt.

D'Kultivatioun vun der gesättigte Biomass vun Zellen vum rekombinantem Stamm bitt den Ufank vun der Produktioun vun engem Hybridprotein, d'Isolatioun an d'Seksequent Transformatioun vun deem a Réier féiert zum Insulin.

Eng aner Grupp vu Fuerscher krut e rekombinant Protein am bakterielle Ausdrockssystem vun enger Fusioun, déi aus mënschleche Proinsulin besteet an e Polyhistidin Schwanz, deen et duerch e Methioninreste verbonne war. Et gouf mat Hëllef vu Chelatchromatographie op Ni-Agarosekolonnen aus Inklusiounskierper isoléiert a mat Cyanogenbromid verdaut.

Kartéieren a Massespektrometresch Analyse vum gewonnenen Proinsulin purifizéiert duerch Ionaustauschschromatographie op Anionaustauschharz a RP (ëmgedréit Phas) HPLC (Héichleistung Flëssegkeetchromatographie) huet d'Präsenz vun Disulfidbrécke gewisen entsprécht disulfid Brécke vum nativen Mënsch Proinsulin. Et gëtt och iwwer d'Entwécklung vun enger neier, verbesserte Methode gemellt fir de Mënsch Insulin ze produzéieren duerch genetesch Ingenieuren an prokaryoteschen Zellen. D'Autoren hunn erausfonnt datt dat resultéierend Insulin a senger Struktur a biologescher Aktivitéit identesch ass mam Hormon dat aus der Bauchspaicheldrüs isoléiert ass.

Viru kuerzem gouf opmierksam gemaach fir d'Prozedur ze vereinfachen fir rekombinant Insulin duerch genetesch Ingenieuren ze produzéieren. Sou gouf e Fusiounsprotein kritt deen aus dem Leaderpeptid vum Interleukin besteet, deen un den N-Uschloss vum Proinsulin verbonne war duerch de Lysinreschter. De Protein war effizient ausgedréckt a lokaliséiert an Inklusiounskierper.

No der Isolatioun gouf de Protein mat Trypsin verdaut fir Insulin a C-Peptid ze produzéieren. Eng aner Grupp vu Fuerscher huet sech op ähnlech Manéier gehandelt. E Fusiounsprotein besteet aus Proinsulin an zwee syntheteschen Beräicher vum Staphylokokk A Proteinbindende IgG war lokaliséiert an Inklusiounskierper, awer hat e méi héicht Ausdrockniveau.

De Protein gouf mat IgG Affinitéitskromatographie isoléiert a mat Trypsin a Carboxypeptidase B verdaut. De resultéierende Insulin an C-Peptid goufe vu RP HPLC gereinegt. Beim Schafe vu geschmoltenem Strukturen ass d'Massverhältnis vum Trägerprotein an Zilpolypeptid ganz bedeitend.

D'Konstruktioun vu Fusiounskonstrukture gëtt beschriwwen, wou e mënschlecht Serumalbuminbindende Protein als Carrier Polypeptid benotzt gëtt. Ee, dräi a siwe C-Peptide waren derbäi.

C-Peptidë goufen op Kappschwanzbasis mat Aminosauerraumberäicher verbonne mat der Sfi I Restriktiounssäit an zwee Argininreschter am Ufank an um Enn vum Spacer fir spéider Proteinsplittung mat Trypsin verbonnen. HPLC vun de Spaltungsprodukter huet gewisen datt d'Spaltung vum C-Peptid quantitativ ass, an dëst erlaabt d'Benotzung vu multimeren syntheteschen Genen fir Zil Polypeptiden op enger industrieller Skala ze kréien.

E Mutant proinsulin kréien, deen den Ersatz vun der Arg32Tyr enthält. Wann dëst Protein mat Trypsin an der Carboxypeptidase B gekollt gouf, gouf gebierteg Insulin an e C-Peptid enthale mat der Tyrosinreschter. Déi lescht, nom Etiketten 125I, gëtt aktiv an Radioimmunoassay benotzt.

Insulin fir d'Produktioun vun Drogen geduecht, muss héich Puritéit sinn. Dofir ass eng héich effektiv Kontroll vun der Rengheet vun de Produkter déi an all Etapp vun der Produktioun kritt goufen. Virdru goufen RP an IO (Ionaustausch) HPLC benotzt fir Proinsulin-S-Sulfonat, Proinsulin, eenzel A- a B-Ketten ze charakteriséieren, an hir S-Sulfonate.

Besonnesch Opmierksamkeet gëtt och fir d'fluoreszent Insulinderivat bezuelt. An der Aarbecht hunn d'Auteuren d'Uwendbarkeet an d'Informativitéit vu chromatografesche Methoden an der Analyse vu Produkter an alle Stadien vun der mënschlecher Insulinproduktioun ënnersicht an e Schema vun der chromatografescher Operatioun opgesat fir effektiv déi resultéierend Produkter ze trennen.

Zousätzlech ginn Approche entwéckelt fir d'Prozesser ze automatiséieren an ze beschleunegen fir d'Rengheet an d'Quantitéit un Insulin ze bestëmmen.

Studien iwwer d'Méiglechkeet d'RP Flëssegkeetchromatographie mat elektrochemescher Detektioun fir Insulin ze bestëmmen gi bericht, an eng Methodologie fir Insulin ze bestëmmen aus der Langerhans Insel duerch Immunoaffinitéitschromatografie mat spektrometrescher Detektioun gouf entwéckelt.

An der Aarbecht gouf d'Méiglechkeet fir séier Mikrobestëmmung vun Insulin mam Kapillaren Elektrophorese mat Laser-Fluoreszenzdetektioun z'ënnersichen.D'Analyse gëtt gemaach andeems en zu enger Probe e bekannte Betrag vun Insulin mam Phenylisothiocyanat (FITC) an e Fab Fragment vun monoklonalen Insulinantikörper addéiert. Etikettéiert a reegelméisseg Insuline reagéiere kompetitiv mam Fab Komplex. De FITZ-labeléierte Insulin a säi Komplex mam Fab ginn an 30 Sekonne getrennt.

Gentechnik Insulin

D'Fro vun deem Insulin gemaach ass interessant net nëmme fir Dokteren an Apdikter, awer och fir Patiente mat Diabetis mellitus, wéi och hir Familljen a Frënn.

Haut kann dësen eenzegaartegen an sou wichtege Hormon fir d'mënschlech Gesondheet aus verschiddene Rohmaterialien mat Hëllef vu speziell entwéckelt a suergfälteg getesteten Technologien kritt ginn. Ofhängeg vun der Method vun der Virbereedung ginn déi folgend Aarte vun Insulin ënnerscheet:

• Schwäin oder Rëndfleesch, och Déiereprodukt genannt
• Geännert biosynthetesch Schwäin geännert
• Genetesch manipuléiert oder recombinant
• Genetesch geännert
• Synthetesch

Schwäin Insulin gouf de längsten fir Diabetis benotzt. Seng Uwendung gouf an den 20er vum leschte Joerhonnert ugefaang.

Et sollt bemierkt datt Schweinefleesch oder Déier dat eenzegt Medikament war bis an d'80er Jore vum leschte Joerhonnert. Fir en ze kréien, gëtt Déieren Bauchspaicheldrüssauer benotzt.

Wéi och ëmmer, dës Method kann kaum optimal oder einfach genannt ginn: Aarbecht mat biologesche Rohmaterialien ass net ëmmer praktesch, an d'Rohmaterial selwer ass net genuch.

Zousätzlech ass d'Zesummesetzung vu Porzinsinsulin net komplett mat der Zesummesetzung vum Hormon produzéiert vun enger gesonde Persoun: verschidde Aminosauerreschter sinn an hirer Struktur präsent. Et sollt bemierkt datt d'Hormonen, déi vun der Bauchspaicheldrüs produzéiert gi sinn eng nach méi grouss Zuel vun Differenzen hunn, wat net e positivt Phänomen kann genannt ginn.

An esou enger Virbereedung, nieft der purem multikomponenten Stoff, ass de sougenannte Proinsulin onbegrenzbar, eng Substanz déi net mat modernen Reinigungsmethoden getrennt ka ginn. Et ass hien, deen dacks eng Quell vun allergesche Reaktiounen gëtt, wat besonnesch geféierlech fir Kanner an eeler Leit ass.

Apotheken wëllen nach eng Kéier bei Diabetiker ofginn. Et gëtt e verständlecht modernt europäescht Medikament, awer se halen roueg doriwwer. Dëst ass.

Aus dësem Grond hunn d'Wëssenschaftler weltwäit laang interesséiert fir d'Zesummesetzung vum Hormon dat vun den Déieren produzéiert gouf, voll mat der Bauchspaicheldrüs Hormone vun enger gesonde Persoun ze bréngen. E richtegt Duerchbroch an der Pharmakologie an der Behandlung vun Diabetis war d'Produktioun vun engem semi-syntheteschen Medikament dat kritt gouf andeems d'Aminosaier Alanin an enger Dierpräparatioun duerch Threonin ersat gouf.

Zur selwechter Zäit ass eng semi-synthetesch Method fir den Hormon ze produzéieren baséiert op der Notzung vun Déierpräparatiounen. An anere Wierder, si gi ganz einfach Modifikatioune ënner a ginn identesch mat Hormonen, déi de Mënsch produzéiert. Ënnert hire Virdeeler ass Kompatibilitéit mam mënschleche Kierper an der Fehlen vun allergesche Reaktiounen.

D'Nodeeler vun dëser Method gehéieren de Mangel u Rohmaterial an der Schwieregkeet fir mat biologesche Materialien ze schaffen, souwéi déi héich Käschte fir souwuel d'Technologie selwer wéi och dat resultéierend Medikament.

An dëser Hisiicht ass dat bescht Medikament fir d'Behandlung vun Diabetis rekombinant Insulin kritt duerch genetesch Ingenieur.

Iwwregens gëtt et dacks genmanipuléiert Insulin genannt, wat domat d'Method ugewise gëtt fir et z'erreechen, an dat resultéierend Produkt gëtt mënschlecht Insulin genannt, an doduerch seng absolut Identitéit betount fir d'Hormonen, déi vun der Bauchspaicheldrüs vun enger gesonde Persoun produzéiert ginn.

Ënner de Virdeeler vum geneteschen Ingenieursinsulin, sollt een och säi héije Grad vu Rengheet a Mangel u Proinsulin bemierken, an och de Fakt datt et keng allergesch Reaktiounen verursaacht an keng Kontraindikatiounen huet.

Déi dacks gefrot Fro ass verständlech: aus wat ass genau rekombinant Insulin gemaach? Et stellt sech eraus datt dëst Hormon duerch Hefestämme produzéiert gëtt, souwéi Escherichia coli, an engem speziellen Nährstoffmedium plazéiert. Ausserdeem ass de Betrag vun der gewonnener Substanz sou grouss datt et méiglech ass d'Benotzung vun Drogen aus Déierenorganer komplett opzeginn.

Natierlech ass dëst net iwwer einfach E. coli, awer ëm genmodifizéiert a fäeg fir opléisbar mënschlech genetesch manipuléiert Insulin ze produzéieren, d'Zesummesetzung an d'Eegeschafte vun deenen exakt d'selwecht sinn wéi dat Hormon dat duerch d'Zelle vun der Bauchspaicheldrüs vun enger gesonde Persoun produzéiert gëtt.

D'Virdeeler vum Gentechnik Insulin sinn net nëmmen seng absolut Ähnlechkeet mam mënschlechen Hormon, awer och d'Liichtegkeet vun der Virbereedung, eng genuch Betrag u Rohmaterialien an bezuelbare Käschte.

Wëssenschaftler weltwäit nennen d'Produktioun vum rekombinant Insulin e wierklechen Duerchbroch an der Behandlung vun Diabetis. D'Bedeitung vun dëser Entdeckung ass sou grouss a wichteg datt et schwiereg ass ze iwwerschätzen.

Et ass einfach genuch ze bemierken datt haut bal 95% vum Bedierfnes fir dësen Hormon mat der Hëllef vum genetesch manipuléierten Insulin erfëllt gëtt.

Zur selwechter Zäit hunn Dausende vu Leit, déi virdru eng Allergie op Drogen haten eng Chance fir en normaalt Liewen.

Ech hat Diabetis fir 31 Joer. Hien ass elo gesond. Awer, dës Kapselen sinn net zougänglech fir normal Leit, se wëllen net Apotheken verkafen, et ass net rentabel fir si.

Wéi mënschlech Ingenieur Insulin funktionnéiert

Bei der Behandlung vum Typ 1 Diabetis mellitus gëtt zwou-Phas menschlech genetesch Ingenieur Insulin benotzt. An den Apdikten gëtt et a Form vun enger Léisung verkaaft an huet d'Mark "Loved". Déi zweet Aart vu Krankheet kann och mat sou engem Medikament behandelt ginn, wann déi verschriwwene Medikamenter net fir eng Diabetiker gëeegent sinn.

Genetesch manipuléiert Insulin gëtt och benotzt wann eng Persoun eng diabetesch Koma huet. Dokteren verschreiwen dacks Injektiounen un schwangere Fraen, déi diagnostizéiert sinn mat Diabetis mellitus wann Zocker senkende Pillen an eng therapeutesch Ernärung net hëllefen.

Allgemeng gi genetesch manipuléiert Insuliner oder GMOen während der Gebuert benotzt, wa se eng Chirurgie ënnerhalen, oder wann den Diabetiker schwéier blesséiert ass. D 'Medikament erlaabt Iech sécher op d' Benotzung vu séier handlende Hormonen ze wiesselen.

1. Virun Insulin biphasesch Mënsch genetesch Ingenieuren ze benotzen, ass et néideg en Test ze maachen an erauszefannen ob dës Medizin fir de Patient gëeegent ass. Wann en Diabetiker Hypoglykämie enthält, ass d'Benotzung vum Medikament net recommandéiert.
2. De Schema vun der Handlung vun der Léisung ass datt genetesch konstruéiert Insulin mat den Zellen interagéiert, wat zu der Bildung vu Komplexen féiert. Wann d'Zellen dës Komplexe eraginn, gi se stimuléiert a fänken méi aktiv un. Als Resultat gi méi Enzyme produzéiert.
3. Am Prozess gëtt Glukose méi séier absorbéiert, Kuelenhydrater, déi an de Kierper ginn, ginn aktiv veraarbecht. Also produzéiert d'Liewer Glukos méi laang, a Proteine ​​kënnen vill méi séier absorbéiert ginn.

De Prinzip vun der Handlung vum Medikament hänkt vun der Doséierung of, vun der Aart vun Insulin, Wiel vun der Injektiounsplaz. All Prozedur soll nëmmen nom Accord mat dem behandlende Dokter gemaach ginn. Déi éischt Injektiounen ginn ënner medizinescher Opsiicht gemaach.

Empfehlungen fir d'Benotzung vum Medikament

Wéi oder Insulin biphasesch Mënsch genetesch Ingenieuren hu verschidden Handelsnamen. Och Hormone kënnen an der Dauer vun der Handlung variéieren, d'Methode vun der Virbereedung vun der Léisung. Produkter ginn genannt op Basis vun der Aart vun Insulin.

Genetesch konstruéiert Insuline gehéieren zu sou Medikamenter wéi Humudar, Vozulim, Actrapid. Assuran, Gensulin. Dëst ass net eng komplett Lëscht vun esou Drogen, hir Zuel ass zimmlech grouss.

All déi uewe genannte Medikamenter variéieren wat d'Belaaschtung vum Kierper ugeet.GMOs kënnen e puer Stonnen daueren oder ganz Deeg aktiv sinn.

Zwee-Phas Kombinatioun Medikamenter enthalen Medikamenter déi verschidde Komponenten enthalen déi d'Period vun der Expositioun vum Medikament änneren.

• Esou Medikamenter ginn a Form vu Mëschunge verkaaft, dorënner Hormone, déi genetesch kritt goufen.
• Dës Fongen enthalen de Mikstard, Insuman, Gansulin, Gensulin.
• Medikamenter ginn zweemol am Dag benotzt, eng hallef Stonn virum Iessen. Sou ee System soll strikt agehale ginn, well d'Hormon ass direkt mat der Period vun der Nahrungsaufgab verbonnen.

Duerch Genproduktioun vu mënschlechen Insulin gëtt eng Virbereedung kritt, déi eng duerchschnëttlech Beliichtungszäit huet.

1. D'Léisung gëtt a 60 Minutten a Kraaft, awer de Moment vun der héchster Aktivitéit gëtt sechs bis siwe Stonnen no der Injektioun observéiert.
2. D'Medizin ass no 12 Stonnen komplett aus dem Kierper geläscht.
3. Esou Medikamenter enthalen Insuran, Insuman, Protafan, Rinsulin, Biosulin.

Et ginn och GVOe mat enger kuerzer Expositiounsperiod am Kierper. Dës enthalen Drogen Insulin Actrapid, Gansulin, Humulin, Insuran, Rinsulin, Bioinsulin. Esou Insuline hunn eng aktiv Phas no zwou bis dräi Stonnen, an déi éischt Zeeche vum Medikament kënne bannent enger hallef Stonn no der Injektioun gesi ginn.

Ier Insulin administréiert gëtt, musse GMOe fir Transparenz an der Verontreiung vu frieme Substanzen an der Flëssegkeet ënnersicht ginn. Wann auslännesch Substanzen, Turbiditéit oder Nidderschlag an der Medizin erschéngen, da muss d'Vial geheit ginn - d'Medizin ass net gëeegent fir ze benotzen.

Den Insulin deen benotzt gëtt muss bei Raumtemperatur sinn. D'Doséierung vum Hormon muss ugepasst ginn wann den Diabetiker eng infektiiv Krankheet huet, Schilddrüsefunktioun, Addisons Krankheet, Hypopituitarismus a chronescher Nierkrankheet.

Attacke vun Hypoglykämie sinn méiglech mat enger Iwwerdosis vum Medikament, am Fall vun enger Iwwergangs op eng nei Aart vun Insulin, wéinst iwwersprangen Iessen oder kierperlecht Iwwerstrain. Och de Feeler kann Krankheeten sinn, déi d'Bedierfnes vun engem Hormon reduzéieren - e schwéiere Grad vun Nierkrankheeten, Lebererkrankheet, ofgeholl Schilddrüs, Adrenal Cortex, an Hypofysen.

1. Eng schaarf Ofsenkung vum Bluttzocker ass méiglech mat enger Verännerung vum Injektiounsberäich. Dofir ass et noutwendeg fir aus enger Aart Insulin raisonnabel ze wiesselen an nëmmen nom Accord mam behandelenden Dokter.
2. Wann en Diabetiker kuerz-handlungsräich Insulin benotzt, dauert heiansdo de Volumen vum Fettgewebe op der Injektiounsplaz erof oder ëmgekéiert. Fir dëst ze vermeiden, muss d'Injektioun op verschiddene Plazen gemaach ginn.

Schwangere Frae musse wëssen datt Insulin Ufuerderunge wärend verschidden Trimester vun der Schwangerschaft kënne variéieren. Fir dëst ze maachen, musst Dir en deegleche Bluttzocker Test mat engem Glucometer ausféieren.

D'Aktioun vum Insulin am mënschleche Kierper gëtt am Video an dësem Artikel am Detail beschriwwen.

1. D'Struktur a Funktioune vum Insulin 5

1.1. D'Struktur vun der Insulin Molekül 5

1.2. Déi biologesch Bedeitung vun Insulin 7

1.3. Insulin Biosynthese 8

2. Gentechnik Insulinsynthese 10

2.1. D'Benotzung vu gentechneschen Methoden fir d'Synthese vun Drogen 10

2.2. Genetesch Ingenieursmethoden 11

2.3. Gentechnik Insulin Produktioun 14

Konklusioun 18

Iwwerdosis Symptomer

Wann Dir Insulin benotzt, ass et wichteg den Empfehlungen vum Dokter ze verfollegen an déi exakt Doséierung vum verschriwwenen Medikament ze beobachten.

Am Fall vun Net-Konformitéit mat de Reegelen an enger Iwwerdosis, fänkt den Diabetiker mat schwéiere Kappwéi, Krämp, Honger, Schweessen, Häerzfrequenz, déi Persoun gëtt iwwerwierkt, irritéiert. Chillungen am ganzen Kierper a Betränkung kënnen och beobachtet ginn.

Esou Symptomer si ganz ähnlech wéi Unzeeche vun enger Ofsenkung vum Bluttzocker.Mat enger mëller Etapp vu Symptomer kann den Diabetiker onofhängeg de Problem léisen an d'Konditioun verbesseren. Fir dëst ze maachen, iesst Séissegkeeten oder all aner séiss Produkt dat Zocker enthält.

• Wann en diabetesche Koma optriede benotzt se eng Dextrose-Léisung, gëtt de Medikament intravenös verwalt bis déi Persoun sech bewosst ass. Bei den éischte verdächtege Schëlder ass et néideg eng Ambulanz ze ruffen, déi de Patient duerch Noutmethoden an d'Liewe brénge kann.
• Als Nebenwirkungen no der Verwäertung vun GMOen huet eng Persoun Hautausschlag op der Haut a Form vun Urtikaria, Deeler vum Kierper schwellen, de Blutdrock fällt schaarf, Jucken a Kürzheet vum Atem kënnen optrieden. Dëst ass eng allergesch Reaktioun op e Medikament, wat no enger Zäit eleng ka verschwannen ouni medizinesch Interventioun. Wann d'Situatioun weider geet, sollt Dir Ären Dokter konsultéieren.
• An den éischten Deeg vun der Insulinpräparatioun huelen Diabetiker de Kierper dacks dehydréiert, eng Persoun erliewt e Manktem u Flëssegkeet, den Appetit verschlechtert, Schwellungen op den Aarm an de Been erschéngt a konstant Schléifheet ass gefillt. Esou Symptomer ginn normalerweis séier fort a ginn net erëm.

Bewäertungen a Kommentaren

Ech hunn Typ 2 Diabetis - net-Insulin ofhängeg. E Frënd huet beroden d'Bluttzocker mat DiabeNot ze senken. Ech hunn iwwer den Internet bestallt. Ugefangen der Empfang.

Ech folgen eng net strikt Ernärung, all Moien hunn ech ugefaang 2-3 Kilometer zu Fouss. An de leschten zwou Wochen hunn ech eng glat Ofsenkung vun Zocker um Meter am Moien virum Frühstück vun 9.3 op 7.1 gemierkt, a souguer op 6 gëschter.

1! Ech maache weider de präventive Cours. Ech annuléieren iwwer Erfolleger.

Margarita Pavlovna, ech souz elo och op Diabenot. SD 2. Ech hu wierklech keng Zäit fir eng Diät a Spazéiergang, awer ech mëssbraucht Séissegkeeten a Kuelenhydrater, ech mengen XE, awer wéinst dem Alter ass den Zocker nach ëmmer héich.

D'Resultater si net sou gutt wéi Är, awer fir 7,0 Zocker kënnt net fir eng Woch eraus. Mat wéi engem Glucometer maacht Dir Zocker? Weist hien Iech Plasma oder ganz Blutt? Ech wëll d'Resultater vu Medikamenter huelen.

Villmols Merci fir sou en informativen Post.

Gentechnik Insulin Produktioun

Fir eng Persoun gesond ze fillen, musst Dir den Niveau vum Insulin am Kierper iwwerwaachen. Dëst Hormon soll genuch sinn fir datt d'Glukos net am Blutt ophëlt. Soss, am Fall vu metabolesche Stéierungen, diagnostizéiert den Dokter Diabetis.

Therapie fir déi fortgeschratt Etapp vun Diabetis mellitus ass déi fehlend Konzentratioun vun Insulin ze replenéieren, wat net natierlech vum Kierper kann produzéiert ginn. Fir dësen gëtt soluble Insulin benotzt, wat ähnlech wéi de Mënsch genetesch manipuléiert ass. Bauchspaicheldrüs ass verantwortlech fir d'Produktioun vun sou engem Hormon.

Fir d'Produktioun vun Insulin benotzt net nëmmen d'Technologie fir den natierlechen Hormon ze produzéieren, d'Fabrikanten benotzen och kënschtlech kritt modifizéiert Insulin. D'Medikament "solubilis" markéiert ass als soluble uginn.

Aarte vun Drogen

Wéi oder Insulin biphasesch Mënsch genetesch Ingenieuren hu verschidden Handelsnamen. Och Hormone kënnen an der Dauer vun der Handlung variéieren, d'Methode vun der Virbereedung vun der Léisung. Produkter ginn genannt op Basis vun der Aart vun Insulin.

Genetesch konstruéiert Insuline gehéieren zu sou Medikamenter wéi Humudar, Vozulim, Actrapid. Assuran, Gensulin. Dëst ass net eng komplett Lëscht vun esou Drogen, hir Zuel ass zimmlech grouss.

All déi uewe genannte Medikamenter variéieren wat d'Belaaschtung vum Kierper ugeet. GMOs kënnen e puer Stonnen daueren oder ganz Deeg aktiv sinn.

Zwee-Phas Kombinatioun Medikamenter enthalen Medikamenter déi verschidde Komponenten enthalen déi d'Period vun der Expositioun vum Medikament änneren.

• Esou Medikamenter ginn a Form vu Mëschunge verkaaft, dorënner Hormone, déi genetesch kritt goufen.
• Dës Fongen enthalen de Mikstard, Insuman, Gansulin, Gensulin.
• Medikamenter ginn zweemol am Dag benotzt, eng hallef Stonn virum Iessen. Sou ee System soll strikt agehale ginn, well d'Hormon ass direkt mat der Period vun der Nahrungsaufgab verbonnen.

Duerch Genproduktioun vu mënschlechen Insulin gëtt eng Virbereedung kritt, déi eng duerchschnëttlech Beliichtungszäit huet.

1. D'Léisung gëtt a 60 Minutten a Kraaft, awer de Moment vun der héchster Aktivitéit gëtt sechs bis siwe Stonnen no der Injektioun observéiert.
2. D'Medizin ass no 12 Stonnen komplett aus dem Kierper geläscht.
3. Esou Medikamenter enthalen Insuran, Insuman, Protafan, Rinsulin, Biosulin.

Et ginn och GVOe mat enger kuerzer Expositiounsperiod am Kierper. Dës enthalen Drogen Insulin Actrapid, Gansulin, Humulin, Insuran, Rinsulin, Bioinsulin. Esou Insuline hunn eng aktiv Phas no zwou bis dräi Stonnen, an déi éischt Zeeche vum Medikament kënne bannent enger hallef Stonn no der Injektioun gesi ginn.

Esou Medikamenter ginn no sechs Stonnen komplett ausgeschloss.

Benotzung vun Insulinléisleche Mënsch genetesch fir Diabetis

Mënsch genetesch manipuléierten Insulin ass e gemeinsamen Hormonersatz fir Insulin dat d'Bauchspaicheldrüs produzéiert.

Net nëmmen genetesch modifizéiert Mënsch Hormon gëtt fir Synthese benotzt, awer och synthetesch erstallt Substanz. Eng aner bekannte Optioun fir den Medikament ze kreéieren ass d'Benotzung vu modifizéierte Schwäin Insulin, well

a senger Zesummesetzung a Funktiounen ass et am nootste vum Mënsch.

Gentechnik Insulin Produktiounsplang.

Indikatiounen a Kontraindikatiounen

Genetesch konstruéiert Insulin ka souwuel fir Typ 1 Diabetis mellitus wéi och fir Typ 2 Diabetis benotzt ginn, wann eng stänneg Reaktioun op mëndlech Medikamenter mat enger hypoglykemescher Natur beobachtet gëtt.

Et kann benotzt ginn wann de Patient a verschiddenen Zorte vu Koma ass. Wann eng schwangere Fra just ufänkt Diabetis ze kréien, dann ass d'Benotzung vum Ingenieurinsulin erlaabt, awer nëmmen wann d'Diät net hëlleft Glukosniveauen ze beaflossen. Seng Uwendung ass recommandéiert a Fäll vun enger Infektioun mat Infektiounen, an deenen Hyperthermie observéiert kënne ginn.

Genpräparatiounen sinn erfollegräich an hirer Benotzung wärend der Gebuert, Operatiounen, Verletzungen, metabolesche Stéierungen an am Fall vun engem graduellen Iwwergang zum Insulin mat enger laanger Handlung.

Et ass verbueden Genpräparatiounen ze benotzen, déi den Hormon ersetzen duerch Iwwerempfindlechkeet fir verschidde Elementer vum Medikament a mat Hypoglykämie.

Pharmakologesch Handlung vun Drogen

Medikamenter vun dësem Typ reagéiere mat bestëmmte Rezeptoren vun Zellmembranen, a bilden Komplexe mat hinnen. Wann et an d'Zellen trëppelt, beaflosst d'Komplex vum Medikament d'Aarbecht, stimuléiert se méi aktiv ze ginn an zousätzlech Enzymen ze produzéieren.

De Glukosniveau fällt wéinst der Tatsaach datt et méi séier duerch Zellen veraarbecht gëtt. Duerno gëtt de Prozess vun der Lipogenese, d'Proteinproduktioun beschleunegt an d'Geschwindegkeet vun der Liewer bei der Bildung vu Glukos reduzéiert.

D'Dauer vum Medikament hänkt vun der Injektiounsplaz of, Typ Drogen, Doséierung an individuell Äntwert vum mënschleche Kierper. Nëmmen en Dokter kann Dosen setzen a bestëmmte Medikamenter an dëser Grupp verschreiwen. An der initialer Period vun Drogen huelen, ass de Patient vun Dokteren iwwerwaacht fir erauszefannen ob d'Droge refuséiert gëtt.

Beispiller vu genetesch manipuléierten mënschlechen Insulin Medikamenter

Mënsch genetesch manipuléierten Insulin ass an sou bekannten Medikamenter wéi Insuran, Insuman, Vozulim, Penfill, Biosulin, Gensulin, Actrapid, Rinsulin, Humulin, Humudar, Rosinsulin an e puer anerer enthale sinn.

Et gi verschidden Aarte vun Insulin.Eng vun de Klassifikatiounen bezitt sech op d'Dauer vum Medikament. No hir, kann opléisen Insulin eng kuerz a laang Aktioun hunn. Et gi kombinéiert Medikamenter (biphasescht Insulin), déi eng Substanz vu béide séier a verlängerter Handlung enthalen.

Dës Zort Medikamenter gëtt eng Mëschung genannt. Ënner hinnen sinn et déi déi mat enger Verännerung vum mënschlechen Hormon geschaf ginn. Zwe-Phas Insulin ass Mikstard, Gansulin, Insuman, Humulin a Gensulin. Si musse zweemol am Dag benotzt ginn, eng hallef Stonn virum Iessen.

Dëst ass wéinst der Tatsaach datt Zwee-Phase Insulin eng kuerz wierksam Substanz huet, an déi Entfale hänkt vun der Diät of.

En Ingenieursanalog vum mënschlechen Hormon ass ënner Drogen mat engem duerchschnëttleche Grad vun Dauer. Dëst opléisen Insulin fänkt no enger Stonn ze handelen, an de Peak vu senger Aktivitéit geschitt no 7 Stonnen. No 12 Stonnen ass et ugewisen. De Mënsch genetesch manipuléiert Medikament vun dëser Grupp ass Insuman, Protafan, Humulin, Rinsulin, Biosulin, Gensulin, Gansulin, Insuran.

Et gëtt e Mënsch genetesch manipuléiert Medikament ënner der Grupp mat enger kuerzer Handlung. Zum Beispill dës enthalen Gansulin, Insuran, Humulin, Rinsulin, Gensulin, Bioinsulin an Actrapid. Esou soluble Insulin fänkt an enger halwer Stonn ze handelen, a seng Aktivitéit erreecht säi Maximum an e puer Stonnen. Esou Medikamenter ginn fir 6 Stonnen ausgeschloss.

Am Fall vun enger Iwwerdosis Medikamenter mat genetesch manipuléierten Insulin, Schwächung, Schléifheet, Middegkeet, Reizbarkeet, Rillungen, verstäerkte Ausscheedung vu kale Schweess, Zidderpartie, Pallor, Palpitatiounen, Kappwéi, Krämp an Honger. All dës sinn Symptomer vun Hypoglykämie.

Wann dës Krankheet just ugefaang huet sech z'entwéckelen an ass a senge fréieren, méi einfache Stadien, da kënnt Dir all d'Symptomer selwer erofhuelen. Fir dëst ze maachen, musst Dir Liewensmëttel mat Zocker iessen an héich an Kuelenhydrater iessen, déi einfach verdaut kënne ginn. Glucagon an Dextrose Léisung kënnen an de Kierper agefouert ginn.

Wann eng Persoun an e Koma gefall ass, musst Dir eng modifizéiert Dextrose-Léisung sprëtzen bis d'Situatioun sech verbessert.

Verschidde Leit kënnen allergesch Reaktiounen op d'Benotzung vu genetesch modifizéierten Drogen mat Insulin entwéckelen. Symptomer kënnen Hives, Schwellung, Verloscht vu Kraaft, niddrege Blutdrock, kuerz Atem, Ausschlag, Féiwer a Jucken.

An e puer Fäll entstinn Hypoglykämie a Koma. Probleemer mat dem mënschleche Bewosstsinn an och e Koma kënne optrieden. Wann e Patient Medikamenter verpasst huet, da kann hien Hyperglykämie entwéckelen.

Et erschéngt wéinst virleefeg niddreg Doséierungen, mat der Entwécklung vu infektiivt Phenomener am Kierper, an och wann Dir net un d'Reegele vun der Diät hale kënnt.

A verschiddene Fäll kann de Patient Lipodystrophie entwéckelen an de Plazen, wou de Medikament verwalt gëtt.

Am Ufank vum Gebrauch vum Medikament kann Puffiness, Mangel u Waasser, Schléifkeet, an Appetitsläffel optrieden. Awer dës Phänomener sinn temporär.

D'Benotzung vun engem Ersatz fir natierlecht Insulin, sou wéi eng genetesch manipuléiert Substanz, ass eng exzellent Ergänzung fir d'Behandlung vun Diabetis.

Et hëlleft den Niveau vum Zocker ze reduzéieren wéinst der Tatsaach datt Glukos méi vun den Zellen absorbéiert gëtt, an d'Prozesser vu sengem Transport änneren. Awer dës Medikamenter musse strikt nom Dokterschrëft benotzt ginn, well

si kënne ongewollte Gesondheetseffekter fir de Patient verursaachen.

Vu wat gëtt Insulin gemaach?

Insulin ass d'Haaptmedezin fir d'Behandlung vun Typ 1 Diabetis. Heiansdo gëtt et och benotzt fir de Patient ze stabiliséieren an säi Wuelbefannen an der zweeter Aart Krankheet ze verbesseren. Dës Substanz duerch seng Natur ass en Hormon dat fäeg ass de Kohlenhydratmetabolismus a klengen Dosen ze beaflossen.

Normalerweis produzéiert d'Bauchspaicheldrüs genuch Insulin, wat hëlleft de physiologeschen Niveau vum Bluttzocker ze halen. Awer mat eeschte endokrinen Stéierungen, déi eenzeg Chance fir de Patient dacks ze hëllefen ass genau Insulininjektiounen.

Leider ass et onméiglech et oral ze huelen (a Form vu Pëllen), well et komplett am Verdauungstrakt zerstéiert gëtt a säi biologesche Wäert verléiert.

Virbereedungen aus Matière première vun Déieren

Dëst Hormon vun der Bauchspaicheldrüs vu Schwäin a Rind ze kréien ass eng al Technologie déi haut selten benotzt gëtt.

Dëst ass wéinst der gerénger Qualitéit vum Medizin, dee krut, seng Tendenz zu allergesche Reaktiounen an engem net genuch Grad vun der Reinigung.

De Fakt ass datt zënter dem Hormon eng Proteinsubstanz ass, et aus engem spezifesche Set vun Aminosaieren besteet.

Den Insulin, deen am Kierper vum Schwäin produzéiert gëtt, ënnerscheet sech an der Aminosauerkompositioun vum mënschlechen Insulin duerch 1 Aminosaier, a bovin Insulin duerch 3.

Am Ufank a Mëtt vum 20. Joerhonnert, wann ähnlech Medikamenter net existéieren, och esou en Insulin war e Duerchbroch vun der Medizin an huet erlaabt d'Behandlung vun Diabetiker op en neien Niveau ze huelen. Hormone kritt mat dëser Method reduzéiert Bluttzocker, awer si hunn dacks Nebenwirkungen an Allergien verursaacht.

Differenzen an der Zesummesetzung vun Aminosaieren an Gëftstoffer an der Medizin beaflossen den Zoustand vun de Patienten, besonnesch an de méi vulnéisen Kategorien vu Patienten (Kanner an eeler Leit).

En anere Grond fir déi schlecht Toleranz vu sou Insulin ass d'Präsenz vu sengem inaktiven Virgänger am Medikament (proinsulin), wat onméiglech war fir an dëser Medikamentvariatioun lasszeginn.

Hautdesdaags sinn et fortgeschratt Schweineinsuliner, déi ouni dës Mängel enthalen sinn. Si gi vun der Bauchspaicheldrüs vun engem Schwäin kritt, awer duerno si se zousätzlech Veraarbechtung a Reinigung ënnerworf. Si si multikomponent an enthalen Stoffer.

Geännert Schwäin Insulin ass praktesch net anescht wéi de mënschlechen Hormon, sou datt et nach ëmmer an der Praxis benotzt gëtt

Esou Medikamenter gi vu Patiente vill besser toleréiert a verursaache praktesch keng negativ Reaktiounen, si hämmen net den Immunsystem an reduzéieren effektiv Bluttzocker. Bovine Insulin gëtt haut net an der Medizin benotzt, well wéinst senger auslännescher Struktur huet en negativ op d'Immun an aner Systemer vum mënschleche Kierper.

Genetesch Ingenieur Insulin

Mënschlecht Insulin, dat fir Diabetiker benotzt gëtt, op industrieller Skala kritt een op zwou Weeër:

Späicherkonditioune fir Insulin

• andeems en enzymatesch Behandlung vu Porzininsulin benotzt,
• andeems genetesch modifizéiert Stämme vun Escherichia coli oder Hef benotzt.

Mat enger physikalesch-chemescher Ännerung ginn d'Moleküle vu Porzinsulin ënner der Handlung vu speziellen Enzymer identesch mam mënschlechen Insulin. D'Aminosauer Kompositioun vun der resultéierender Virbereedung ass net anescht wéi d'Zesummesetzung vum natierlechen Hormon dat am mënschleche Kierper produzéiert gëtt.

Wärend dem Fabrikatiounsprozess, gëtt d'Medizin héich Reinigung, dofir verursaacht et keng allergesch Reaktiounen oder aner ongewollte Manifestatiounen.

Awer meeschtens gëtt Insulin mat modifizéierten (genetesch modifizéierten) Mikroorganismen kritt. Mat Hëllef vu biotechnologesche Methoden, Bakterien oder Hef ginn esou geännert datt se selwer Insulin produzéiere kënnen.

Zousätzlech zu der Insulinproduktioun selwer spillt seng Reinigung eng wichteg Roll. Also datt de Medikament keng allergesch an entzündlech Reaktiounen verursaacht, an all Etappe ass et noutwendeg fir d'Rengheet vun de Stämme vu Mikroorganismen an all Léisungen ze kontrolléieren, souwéi d'Inhaltsstoffer.

Et ginn 2 Methode fir sou eng Insulinproduktioun. Déi éischt vun hinnen baséiert op der Verwäertung vun zwee verschiddene Stämme (Spezies) vun engem eenheetlechen Mikroorganismus.

Jiddwer vun hinnen synthetiséiert nëmmen eng Kette vum Hormon DNA Molekül (et ginn nëmmen zwee vun hinnen, a si sinn spirally verdréchent zesumme).

Da sinn dës Ketten ugeschloss, an an der resultéierender Léisung ass et scho méiglech déi aktiv Formen vun Insulin ze trennen vun deenen déi keng biologesch Bedeitung droen.

Deen zweete Wee fir d'Medizin mat Hëllef vun Escherichia coli oder Hef ze kréien ass baséiert op der Tatsaach datt de Mikro fir d'éischt inaktiven Insulin produzéiert (dat ass, säi Virgänger, proinsulin). Dann, mat enzymatescher Behandlung, gëtt dës Form aktivéiert a benotzt an der Medizin.

Personal, déi Zougang zu gewësse Produktiounsanlagen hunn, sollten ëmmer an engem sterile Schutzkleed gekleet sinn, wat de Kontakt vum Medikament mat mënschleche biologesche Flëssegkeeten eliminéiert.

All dës Prozesser ginn normalerweis automatiséiert, d'Loft an all Surfacen a Kontakt mat Ampullen a Fläsch sinn steril, a Linnen mat Ausrüstung sinn hermetesch versiegelt.

Biotechnologie Methoden erméiglechen d'Wëssenschaftler iwwer alternativ Léisunge fir Diabetis ze denken.

Zum Beispill, bis haut, ginn preklinesch Studien vun der Produktioun vu künstlechen Bauchspaicheldrüs Beta Zellen duerchgefouert, déi mat Hëllef vu gentechneschen Methoden kritt kënne ginn.

Vläicht an der Zukunft gi se benotzt fir de Fonctionnement vun dësem Organ bei enger kranker Persoun ze verbesseren.

D'Produktioun vu modernen Insulinpräparatiounen ass e komplexen technologesche Prozess, deen eng Automatiséierung a minimal mënschlech Interventioun involvéiert

Zousätzlech Komponenten

D'Produktioun vun Insulin ouni Huelstoffer an der moderner Welt ass bal onméiglech virzestellen, well se seng chemesch Eegeschafte kënne verbesseren, d'Aktiounszäit verlängeren an en héije Puritéit erreechen.

Duerch hir Eegeschafte kënnen all zousätzlech Zutaten an déi folgend Klassen opgedeelt ginn:

• prolongators (Substanzen déi benotzt gi fir eng méi laang Dauer vun der Wierkung vum Medikament ze liwweren),
• Desinfektions Komponenten
• Stabilisatoren, wéinst deenen eng optimal Aciditéit an der Medikamentléisung oprecht ass.

Verlängerung Zousatzstoffer

Et gi laangwierkend Insuliner, deenen hir biologesch Aktivitéit 8 bis 42 Stonnen dauert (ofhängeg vun der Grupp vun der Medikament). Dësen Effekt gëtt erreecht duerch Zousatz vu speziellen Substanzen - Verlängerer zu der Injektiounsléisung. Déi meescht Oft gëtt ee vun de folgende Verbindunge fir dësen Zweck benotzt:

Proteinen, déi d'Aktioun vum Medikament verlängeren, ënnerfalen detailléiert Reinung a si niddereg-allergesch (zum Beispill Protamin). Zink Salze beaflosse weder Insulinaktivitéit oder mënschlecht Wuelbefannen.

Desinfektiounen an der Zesummesetzung vum Insulin sinn noutwendeg sou datt déi mikrobiell Flora net multiplizéiert beim Lagerung a Gebrauch an et. Dës Substanze si Konservéierungsmëttel a garantéieren d'Erhalen vun der biologescher Aktivitéit vum Medikament.

Ausserdeem, wann de Patient d'Hormon aus enger Fläsch nëmme fir sech selwer administréiert, da kann d'Medizin e puer Deeg daueren.

Duerch héichqualitativ antibakteriell Komponenten, wäert hien net de Besoin hunn en onbenotzt Medikament ze werfen wéinst der theoretescher Méiglechkeet vu Reproduktioun an enger Léisung vu Mikroben.

Folgend Substanzen kënnen als Desinfektiounsmëttel bei der Produktioun vun Insulin benotzt ginn:

Wann d'Léisung Zonkionen enthält, handelen se och als zousätzlech Konservéierung wéinst hirem antimikrobiellen Eegeschafte

Fir d'Produktioun vun all Typ Insulin, bestëmmt Desinfektions Komponenten si passend. Hir Interaktioun mam Hormon muss an der Bühn vu preklinesche Studien ënnersicht ginn, well de Konservéierung däerf déi biologesch Aktivitéit vum Insulin net stéieren oder soss seng Eegeschaften negativ beaflossen.

D'Benotzung vu Konservéierungsmëttel ass an de meeschte Fäll erlaabt datt den Hormon ënner der Haut verwalt ka ginn ouni eng prealabel Behandlung mat Alkohol oder aner Antiseptiker (de Fabrikant bezitt normalerweis dëst an den Instruktioune).

Dëst vereinfacht d'Verwaltung vum Medikament a reduzéiert d'Zuel vun de präparativen Manipulatiounen virun der Injektioun selwer.

Awer dës Empfehlung funktionnéiert nëmme wann d'Léisung mat enger individueller Insulinsprëtz mat enger dënnter Nadel administréiert gëtt.

Stabilisateuren

Stabilisateure sinn noutwendeg sou datt de pH vun der Léisung op engem bestëmmten Niveau gehale gëtt. D'Erhalen vum Medikament, seng Aktivitéit an d'Stabilitéit vu chemesche Eegeschafte hänkt vun der Aciditéitniveau of. Bei der Fabrikatioun vun Injektiounshormon fir Patiente mat Diabetis gi Phosphate normalerweis fir dësen Zweck benotzt.

Fir Insulin mat Zink sinn d'Léisungsstabilisateure net ëmmer gebraucht, well Metallonen hëllefen den néidege Gläichgewiicht ze halen.

Wa se awer benotzt ginn, da ginn aner chemesch Verbindungen anstatt Phosphate benotzt, well eng Kombinatioun vun dëse Substanzen féiert zu Nidderschlag an Onzefriddenheet vum Medikament.

Eng wichteg Eegeschafte fir all Stabilisateure gewisen ass d'Sécherheet an d'Onméiglechkeet fir mat Reaktiounen Insulin an Reaktiounen ze maachen.

E kompetente Endokrinologe sollten mat der Auswiel vun Injektibel Medikamenter fir Diabetis fir all eenzel Patient betreffen.

D'Aufgab vum Insulin ass net nëmmen en normale Niveau vun Zocker am Blutt ze halen, mee och net fir aner Organer a Systemer ze schueden. D 'Medikament soll chemesch neutral sinn, niddreg allergescht a léifste bezuelbar.

Et ass och zimlech praktesch wann de gewielten Insulin mat hiren anere Versioune gemëscht ka ginn no der Dauer vun der Handlung.

Insulin kréien duerch genetesch Ingenieuren, Biotechnologie - Coursen

1. D'Struktur a Funktioune vum Insulin 5

1.1. D'Struktur vun der Insulin Molekül 5

1.2. Déi biologesch Bedeitung vun Insulin 7

1.3. Insulin Biosynthese 8

2. Gentechnik Insulinsynthese 10

2.1. D'Benotzung vu gentechneschen Methoden fir d'Synthese vun Drogen 10

2.2. Genetesch Ingenieursmethoden 11

2.3. Gentechnik Insulin Produktioun 14