Glukosoxidase Glukosebestëmmungsmethod

De Prinzip vun der Method. D'Methode baséiert op der Spezifizitéit vun der Handlung vum Glukosoxidase-Enzym. Dëst Enzym oxidéiert Glukos an der Präsenz vu molekulare Sauerstoff fir Gluconolacton ze bilden, déi spontan zu Gluconsäure hydrolyséieren. Glukosoxidase oxidéiert Glukos fir Waasserstoffperoxid ze bilden (H₂Oh₂), wat mat 4-Aminoantipyrin a Phenol reagéiert ënner der Handlung vu Peroxidase. Als Resultat gëtt eng rosa faarweg Verbindung geformt, deenen hir optesch Dicht op 510 nm proportional zu der Konzentratioun vu Glukos am Probe ass.

Glucose + O₂ + H₂Oh → Gluconsäure + H₂Oh₂

2 N₂Oh₂ + 4-Aminoantipyrin + Phenol → Quinonymin + 4H₂Oh

Equipement CPK, Zentrifuge, Thermostat, Racks, Testréier, Pipetten, biologescht Material, Reagenz enthale sinn an der Aarbechtsléisung.

experimentell Probe, ml

Standard Probe, ml

Idle Test (N₂O), ml

Glukosekalibratiounsléisung (Referenz)

D'Tubes ginn an engem Thermostat bei 37 ° C fir 15 Minutten incubéiert, duerno op engem CPC mat engem grénge Filter an Kuvetten mat enger Schichtdicke vu 5 mm géint eng eidel Prouf (N₂O). Déi rosa Faarf ass fir 1 Stonn no Inkubatioun stabil.

Berechnung Zockergehalt gëtt mat der Formel produzéiert:

C =x C Standard wou

C ass de Glukosgehalt am experimentellen Probe, Mol / l,

Eop - optesch Dicht vum Probe,

Iessen - optesch Dicht vum Kalibratiounsprobe,

C Standard - den Inhalt an der Kalibrierungsléisung, mol / l.

Normale Wäerter:  Neigebueren - 2,8-4,4 mmol / l

 Kanner - 3,9 -5,8 mmol / l

 Erwuessener - 3,9 - 6,2 mmol / l

Hypoglykämie (GHC).D'Erhéijung vun der Bluttzocker ass wéinst ville Grënn, jee no deenen zwou Gruppen vun Hyperglykämie ënnerscheeden.

1. Insular - verbonne mat net genuch Insulin am Kierper oder wéinst der Ineffizienz vu senger Handlung.

2. Extrainsular (extrainsular) - hänkt net vum Afloss vun Insulin of.

Déi folgend Prozesser si bedeitendst bei der Bildung vun HHCs: verstäerkte Glykogenschaltung, verstäerkte Neoglucogenese, Hemmung vun Glykogen Synthese, Ofsenkung vun der Tissu-Glukos Notzung ënner dem Afloss vun hormonellen Insulinantagonisten: Somatotropin, Glucorticoiden, Thyroxin, Thyrotropin.

Alimentär Hyperglykämie gëtt mat exzessiver Inzuch vu Glukos am Blutt bemierkt (zum Beispill Hyperglykämie mat Zockerbelaaschtung). „Hepatesch“ Hyperglykämie geschitt bei diffusen Liewer Läsionen.

Persistent a schwéier Hyperglykämie begleet dacks mat Diabetis. Et ass üblech fir Insulin-ofhängeg Diabetis mellitus an net-Insulin-ofhängeg Diabetis mellitus ze isoléieren, respektiv, Typ I Diabetis mellitus an Typ II Diabetis mellitus. D’Bildung vum Typ I Diabetis ass haaptsächlech verbonne mat enger schlechter Synthese an Metabolismus vum Insulin.

Déi zweet Grupp vu Hyperglykämie ass haaptsächlech verbonne mat Hyperfunktioun vun den endokrine Drüsse produzéieren Hormonen - Insulinantagonisten. Et gëtt a Krankheeten beobachtet wéi Itsenko-Cushings Syndrom a Krankheet, Akromegalie, Thyrotoxikose, Pheochromozytoma, Glucoganom. Bluttzockerspigel erhéicht mat bestëmmte Lebererkrankheeten (besonnesch bei 10-30% Patienten mat Liewerzirrhose), Hämochromatose (pigmentéiert Liewerzirrhose, Bronz Diabetis).

Hypoglykämie (GPG) - eng Ofsenkung vum Bluttzocker ass dacks mat enger absoluter oder relativer Erhéijung vun den Insulinniveauen am Blutt assoziéiert. Extrapancreatesch Hypoglykämie gëtt bezeechent als e Resultat vun engem Ungleichgewicht tëscht der Schwieregkeet vun de Prozesser vun der Glykogenolyse an der Glyconeogenese an der Liewer an akuter a chronescher Hepatitis, Liewerzirrhose, akuter a subakute Liewer Dystrophie, Alkoholstéierung, Vergëftung mat Arsenik, Phosphor, mat verlängerten obstruktive Geleefeg, Liewer Lung An. Eng Ofsenkung vun der Bluttzockerkonzentratioun gëtt dacks bei Patienten, déi Kriibs vun der Speiseröh an aner bösart Tumoren aus der Bauchspaicheldrüs Lokaliséierung (Fibrom, Fibrosarcoma, Neuroma), souwéi mat indomitabele Erbrechung, Anorexie, Hepatesch Diabetis, Uremia, profuse Laktatioun a Glukosurie bei schwangeren Fraen observéiert.

Hypoglykämie ka vu zentral Hierkonft wéinst mentalem Trauma, Encephalitis, subarachnoid Blutungen, Gehirumor.

1. Ierflecher Stéierunge vun der Verdauung vun Kuelenhydrater.

2. Wéi eng Aarte vu Hyperglukosämie sinn Dir bekannt?

3. Wat sinn d'Ursaachen vun der pathologescher Hyperglucoseämie?

4. Wat ass d'Ursaach fir Insulin-ofhängeg Diabetis mellitus?

5. Wat sinn déi biochemesch Ursaachen vun Ierfkrankheeten: a) Glykogenose? b) Aglykogenose? c) Fruktosämie? d) Galaktosämie?

6. Wat sinn déi biochemesch Verännerungen am Kohbhydratmetabolismus während der Fastung?

7. De Prinzip vun der Methode fir d'Glukosetoleranz ze bestëmmen.

Wéini gëtt Glukose-Oxidase Method verschriwwen?

Dësen Test gëtt benotzt fir eng schaarf Zockertoleranz an d'Entwécklung vu Prédiabetes z'entdecken, souwéi op der Héicht vun der Krankheet. Awer fir sou Zwecker gëtt d'Analyse selten benotzt, dëst wéinst senge héije Käschten a laang Erwaardung vun engem Resultat. Déi meescht Oft ass d'Bestëmmung vu Glukos am Blutt an Urin mat dëser Method benotzt an der Differentialdiagnos vu Krankheeten wéi:

Zocker gëtt direkt reduzéiert! Diabetis mat der Zäit kann zu enger ganzer Rëtsch vu Krankheeten féieren, sou wéi Visiounsproblemer, Haut- an Hoerbedéngungen, Geschwüren, Bande an esouguer Kriibstumoren! D'Leit léieren bitter Erfarung fir hir Zockerniveauen ze normaliséieren. weider liesen.

• laktose Intoleranz Syndrom,
• fruktose Intoleranz,
• secretion vu Fruktose mat Kierperflëssegkeeten,
• erhéicht Konzentratioun vu Pentose am Pipi.

Den zweifelsfäerdege Virdeel vum Glukosoxidase Test ass seng Genauegkeet.

Wat ass d'Basis vun dëser Method?

Et gi verschidde Methoden fir d'Konzentratioun vu Glukos am Blutt ze bestëmmen, awer Glukosoxidase ass déi richtegst. Et baséiert op der Tatsaach, datt während der Interaktioun vum Zocker mam atmosphäresche Sauerstoff de Reagens oxydéiert gëtt. Waasserstoffperoxid gëtt an d'Léisung verëffentlecht. Dës Substanz interagéiert mat Orthotoluidin fir eng faarweg Verbindung ze bilden. Fir d'Behuele vun dëser Reaktioun ass d'Präsenz vu speziellen Enzymen néideg. Wärend der Oxidatiounsreaktioun muss d'Glukosoxidase präsent sinn, a wann d'Flëssegkeet staint, muss peroxidase präsent sinn. D'Faarfintensitéit vun der Léisung hänkt vum Glukosgehalt of a wäert am intensivsten op hirem héijen Inhalt.

D'Essenz vun der Glukoseoxidase Glukosebestëmmung

Evaluatioun vum Resultat geschitt mat der quantitativer Method vun der Photometrie no der selwechter Zäit. Et ass obligatoresch eng Kalibrierungsléisung ze benotzen déi eng gewëssen deklaréiert Zockernorm enthält an aus där Dir kënnt d'Konzentratioun vu Glukos an de Kierperflëssegkeeten beuerteelen, dacks am Blutt.

Wéi gëtt d'Analyse ausgefouert?

Material gëtt vum Patient op eidelem Bauch geholl. Fir den Test gëtt venen Blutt an engem Betrag vu 5 ml benotzt. Virun der Diagnos gëtt dem Patient eng strikt Ernärung gewisen. Dëst wäert et méiglech sinn d'Zouverlässegkeet vum Resultat ze beurteelen an eventuell Analysefeeler auszeschléissen. 2 Deeg virum Blutt huelen, sollt de Patient déi schlecht Gewunnechten Alkohol drénken a Fëmmen opzeginn. Et ass och noutwendeg d'Ausbezuelung vun iwwerdéif séiss Liewensmëttel ze limitéieren an stresseg Situatiounen ze vermeiden wa méiglech.

Fir Plasma mam Zocker ze kréien, gëtt Blutt centrifugéiert.

Déi meescht Oft ass dës Method fir d'Glukosekonzentratioun ze bestëmmen duerch Zentrifugatioun gemaach, déi Formelementer isoléiert sinn. De Betrag vun Zocker gëtt scho a Plasma festgeluecht. Wann all noutwendeg Reagenzente derbäi ginn, gëtt d'Faarf no 20 Minutten observéiert wann den Test bei Raumtemperatur ausgefouert gëtt. Berechnung vun Glukos gëtt no dem Kalibratiounsplang duerchgefouert oder d'Regel vu Portioune benotzt.

Fuerschung Reagens

Fir Zocker ze bestëmmen, ass et am beschten fir Expressmethoden ze benotzen fir Glukos am Blutt ze bestëmmen. Dëst ass wéinst der Liichtegkeet an de schnelle Resultater. Zousätzlech brauch de Patient net an de Labo oder d'Spidol. Awer am Géigesaz zum Glukosoxidase Test, sou eng Diagnos ass onverlässeg. Well et d'Glukos net vun aneren Zucker differenzéiert an hir Konzentratioun zesumme bestëmmt.

D'Basis vun der Reaktioun op Glukosoxidase ass Natriumchlorid 9% Léisung an Zinksulfat 50%. Si ginn an der Bühn vun der Zentrifugatioun vum Blutt bäigefüügt. Zousätzlech gëtt eng Pufferléisung mat Essigsäure an Natriumacetat benotzt. D'Titratiounsmethod bestëmmt säin pH bei 4,8. Duerno gëtt Glukosoxidase bäigefüügt, wéinst deem Waasserstoffperoxid a Peroxidase fräigelooss gëtt, wat matmaacht fir d'Léisung an déi gewënscht Konzentratioun ze stainen fir e korrekt Resultat ze kréien.

Normen an der Analyse

D'Mesure vum Zocker fënnt a speziellen Eenheeten - Millimol pro Liter Léisung.

Glukosoxidase Bluttest ass obligatoresch op engem eidle Magen a benotzt Plasma oder Serum fir dësen. D'Norm vu senger Quantitéit fir Erwuessener fir Fraen a Männer ass 3.3-5.5. Fir Kanner ënner 15 Joer ass dës Figur liicht méi niddereg a rangéiert vun 3.2-5.3. Bei Neigebuerenen ass Bluttzocker 1,7-4,2. Eng Erhéijung vun Indikatoren gëtt beobachtet mat der Entwécklung vun engem Patient mat Diabetis mellitus oder mat enger schlechter Glukosetoleranz. Dësen Zoustand ass prediabetes, a wann op Zäit onbehandelt gëtt féiert se séier zur Entwécklung vun dëser schwéiere Pathologie.

Schéngt et ëmmer nach onméiglech fir Diabetis ze heelen?

Jugéiert nom Fakt datt Dir dës Zeilen elo liest, ass eng Victoire am Kampf géint héije Bluttzocker nach net op Ärer Säit.

An hutt Dir scho Gedanke iwwer Spidolbehandlung? Et ass verständlech, well Diabetis ass eng ganz geféierlech Krankheet, déi, wann onbehandelt, kann zu Doud féieren. Konstant Duuschter, séier Urinéierung, verdréit Visioun. All dës Symptomer si vun Iech als éischt bekannt.

Awer ass et méiglech d'Ursaach ze behandelen anstatt mam Effekt? Mir recommandéieren en Artikel iwwer aktuell Diabetisbehandlungen ze liesen. Liest den Artikel >>